EpiQuik CRISPR/Cas9检测ELISA试剂盒（比色法），创新的比色法高通量检测

CRISPR（成簇规律间隔短回文重复序列）和Cas9（CRISPR相关系统或CRISPR相关蛋白9核酸酶）的发现，是细菌用来抵御外来DNA的一种防御机制，已被证明是基因编辑和基因组工程应用中靶向和修改遗传序列的无价工具。CRISPR/Cas9系统通过将RNA引导的Cas9核酸酶和适当的引导RNA（gRNA）送入细胞，实现对靶向基因组位点的序列特异性切割。此外，紧随特异性序列之后的原间隔相邻基序（PAM）序列对于Cas9核酸酶的成功结合是必需的。监测Cas9编辑蛋白的水平或在转染细胞中追踪Cas9编辑蛋白是重要且关键的，因为它可以告知转染效率并优化整个细胞群体中的编辑过程。

EpiQuik? CRISPR/Cas9检测ELISA试剂盒（比色法）适用于使用纯化的Cas9核酸酶和从各种物种的组织和培养细胞中分离的全细胞提取物，特异性定量测量与CRISPR相关的蛋白9（Cas9和dCas9：化脓性链球菌）的量。

艾美捷EpiQuik CRISPR/Cas9检测ELISA试剂盒（比色法）（#P-4060-48）优势与特点：

1、快速高效的实验流程，可在3小时内完成。

2、创新的比色法高通量检测，无需电泳即可定量测量Cas9蛋白量，特别适合筛选Cas9转染克隆。

3、高灵敏度和特异性。检测限低至0.1 ng/孔，在全细胞提取物中指示量范围内的动态范围为0.5-20 ng/孔。仅识别化脓性链球菌Cas9。

4、方便地包含对照用于Cas9量的定量。

5、条带微孔板格式使实验灵活：可手动或高通量操作。

6、简单、可靠且一致的实验条件。

原理与操作流程：

本试剂盒用于测量各种细胞和组织的全细胞提取物或纯化Cas9蛋白中的Cas9水平。在使用该试剂盒的实验中，样本中的Cas9蛋白被紧密且稳定地固定在条带孔上。随后，结合的Cas9蛋白可被检测抗体识别，并通过比色显色试剂进行显色。Cas9的比例与吸光强度成正比。通过与Cas9对照比较，可以定量Cas9的绝对量。

起始材料：

起始材料应为纯化的Cas9核酸酶或全细胞提取物。每次实验所需的全细胞提取物量可在0.5 ?g到5 ?g之间，最佳范围为1到2 ug。起始材料的总体积不应超过4 ul。

文献引用：

Rai MN et. al. (March 2025). Efficient mutagenesis and genotyping of maize inbreds using biolistics, multiplex CRISPR/Cas9 editing, and Indel-Selective PCR. Plant Methods. 21(1):43.

Sharma H et. al. (April 2023). A Scalable High-Throughput Isoelectric Fractionation Platform for Extracellular Nanocarriers: Comprehensive and Bias-Free Isolation of Ribonucleoproteins from Plasma, Urine, and Saliva. ACS Nano.

Baron et. al. (December 2021). Improved alpharetrovirus-based Gag.MS2 particles for efficient and transient delivery of CRISPR/Cas9 into target cells Molecular Therapy: Nucleic Acid.