基因的表观遗传激活或失活在许多重要的人类疾病中,尤其是在癌症中,扮演着关键角色。
表观遗传基因失活的主要机制是由于 DNA 甲基转移酶引起的基因组 DNA 中 CpG 岛的甲基化。组蛋白甲基转移酶(HMTs)通过染色质依赖的转录抑制或激活来控制或调节 DNA 甲基化。HMTs 将 1-3 个甲基基团从 S-腺苷 - L - 甲硫氨酸转移到组蛋白的赖氨酸和精氨酸残基上。SETD1 和 MLL 是主要的组蛋白甲基转移酶,它们催化哺乳动物细胞中组蛋白 H3 在赖氨酸 4(H3-K4)处的甲基化,而 KDM 是主要的组蛋白去甲基化酶,负责去甲基化 H3K4。三甲基 H3K4(H3K4me3)一直被视为高度转录基因的标志性标记,它仅位于启动子下游的 5' 区域。H3K4me3 也可以通过抑制或激活 HMTs 来改变。在血浆或血清中观察到并被证实为许多不同疾病或病理变化(如癌症进展)的标记物的循环组蛋白 H3K4me3。因此,检测循环 H3K4me3 将为更好地理解基因激活和沉默的表观遗传调控、与组蛋白修饰相关的病理过程、疾病相关生物标志物的筛选以及开发针对组蛋白修饰的药物提供有用的信息。
EpiQuik 循环三甲基组蛋白 H3K4 ELISA 试剂盒(比色法)是一套经过优化的缓冲液和试剂,专门用于定量检测血浆和血清中的循环组蛋白 H3K4me3。
艾美捷EpiQuik循环三甲基组蛋白H3K4 ELISA试剂盒(比色法)(#P-3112-48)优势与特点:
快速高效的实验流程,可在 2.5 小时内完成。
高灵敏度和特异性。检测限低至 0.5 ng/孔,血浆/血清在指定量范围内(1-20 ng/孔)的动态范围。仅识别 H3K4me3,与未修饰的 H3 或同一赖氨酸位点的其他修饰无交叉反应。
方便地包含对照,用于 H3K4me3 的定量。
条带微孔板格式使实验具有灵活性:可手动或高通量操作。
简单、可靠且一致的实验条件。
图:使用 EpiQuik? 总组蛋白提取试剂盒(Cat. #OP0006)从 HL-60 细胞中提取组蛋白,并将其以不同浓度掺入牛血浆中。使用 EpiQuik? 循环三甲基组蛋白 H3K4 ELISA 试剂盒(比色法)测定 H3K4me3 的含量。
原理与实验流程:
该试剂盒用于测量血浆或血清中的总 H3K4me3。使用该试剂盒进行实验时,血浆/血清样本中 K4 位点三甲基化的组蛋白 H3 蛋白被固定在涂有抗 H3K4me3 抗体的条带孔中。捕获的 H3K4me3 蛋白随后可被检测抗体识别,再通过显色试剂进行显色。H3K4me3 的比例与吸光度强度成正比。通过与标准对照比较,可以定量测定 H3K4me3 的绝对量。
起始材料:
起始材料应为血浆或血清。每次实验的血浆或血清用量为 10 至 40 uL,最佳用量为 30 uL。
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