组蛋白修饰也被定义为表观遗传修饰因子。组蛋白的翻译后修饰包括:组蛋白乙酰转移酶(HATs)对特定赖氨酸残基的乙酰化、组蛋白去乙酰化酶(HDACs)介导的去乙酰化、组蛋白甲基转移酶(HMTs)对赖氨酸和精氨酸残基的甲基化、组蛋白去甲基化酶(HDMTs)对赖氨酸残基的去甲基化以及组蛋白激酶(HKs)对特定丝氨酸残基的磷酸化。除了 DNA 甲基化外,组蛋白乙酰化和组蛋白甲基化是最为人们熟知的表观遗传标记。一般来说,组蛋白 H3 上的 H3-K4、H3-K36 或 H3-K79 位点的三甲基化会导致染色质结构处于开放状态,因此是常染色质的特征。常染色质还以高水平的组蛋白乙酰化为特征,这一过程由组蛋白乙酰转移酶介导。相反,组蛋白去乙酰化酶能够去除这一表观遗传标记,从而导致转录抑制。赖氨酸残基可以发生单甲基化、双甲基化或三甲基化,每种修饰都能以不同的方式调节染色质结构和转录。除了其他组蛋白修饰(如磷酸化)外,这种巨大的变异导致了不同修饰之间存在无数种可能的组合。这或许构成了一个“组蛋白密码”,不同的细胞因子可以对其进行解读和诠释。
Pre-Sure? 组蛋白 H3 肽阵列 ELISA 试剂盒(比色法) 是一套经过优化的试剂组合,专门用于快速检测针对 46 种不同组蛋白修饰的抗体的特异性和选择性。该试剂盒采用标准微孔板读取器,以简单的 ELISA 格式进行操作。它还适用于鉴定组蛋白修饰酶的底物以及分析组蛋白结合蛋白的特异性。
艾美捷预包被组蛋白H3肽阵列ELISA试剂盒(比色法)(#P-3104-96)优势与特点:
快速高效:整个过程仅需 1 小时 45 分钟。
高质量肽段:肽段纯度超过 95%,经 HPLC 纯化并经质谱验证,然后以两种浓度(2 ng 和 20 ng)包被,可同时筛选强反应和弱反应的抗体、酶和组蛋白结合蛋白。
最全面的组蛋白 H3 修饰种类:包含 46 种单一修饰,涵盖最重要的甲基化(36 种)、乙酰化(8 种)和磷酸化(2 种)修饰。
以 ELISA 格式进行检测,使检测过程简便易行。
简单、可靠且一致的检测条件。
图:组蛋白 H3 抗体的代表性特异性鉴定。组蛋白 H3 阵列用 H3K9me1 多克隆抗体(产品编号:A-4034;1 ?g/mL)进行探针检测。肽段和对照用山羊抗兔 IgG-HRP 和显色系统进行可视化。A:原始图像;B:H3K9me1 抗体特异性和结合强度的图形分析。
原理与流程:
在该试剂盒的检测中,通过生物素 链霉亲和素结合紧密排列在孔中的特定位点修饰的组蛋白 H3 蛋白与抗体、蛋白或酶等输入材料共同孵育。孵育后,通过 ELISA 反应系统(抗体 信号显色试剂)检测特异性结合的输入材料。输入材料的结合强度与吸光度强度成正比。
起始材料:
对于抗体筛选,输入材料为各种感兴趣的 IgG 抗体。对于组蛋白修饰酶 / 蛋白筛选,应使用纯化的酶 / 蛋白。输入材料的用量或浓度取决于检测类型,可由用户自行确定。
文献引用:
Tomooka F et. al. (February 2023). Sulforaphane Potentiates Gemcitabine-Mediated Anti-Cancer Effects against Intrahepatic Cholangiocarcinoma by Inhibiting HDAC Activity. Cells. 12(5)
Mathison A et. al. (February 2020). Discovery, expression, cellular localization, and molecular properties of a novel, alternative spliced HP1γ isoform, lacking the chromoshadow domain. PLoS One. 15(2):e0217452.
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