DNA甲基化(5-甲基胞嘧啶,5mC)是表观遗传调控的核心机制之一,其动态变化直接影响基因表达、基因组印记、转座子抑制及疾病发生。研究表明,5mC的异常积累与多种疾病(如癌症、神经退行性疾病)密切相关。定量检测5mC不仅有助于揭示其在生理和病理过程中的作用,还能为精准医疗提供关键数据支持。例如,5mC的去甲基化途径(如Tet蛋白介导的氧化反应)可能通过生成5-羟甲基胞嘧啶(5hmC)、5-甲酰基胞嘧啶(5fC)和5-羧基胞嘧啶(5caC)参与基因表达调控。因此,开发高灵敏度、高特异性的5mC检测工具,对于理解表观遗传机制和推动疾病诊断具有重要意义。
目前,主流的5mC检测方法包括:
1.亚硫酸盐转化-PCR/Sanger测序:通过将非甲基化胞嘧啶转化为尿嘧啶,而5mC保持不变,再结合PCR扩增和测序分析。该方法可提供单碱基分辨率的甲基化图谱,但操作复杂且耗时较长。
2.甲基敏感限制性酶切:依赖特定酶识别甲基化或非甲基化位点,但仅能覆盖约5-6%的CpG位点,限制了其应用范围。
3.5mC抗体检测(如MeDIP) :利用单克隆抗体富集甲基化DNA,但无法区分5mC与5hmC,且定量精度较低。
4.质谱分析:如MALDI-TOF MS,可检测多种表观遗传修饰,但设备昂贵且技术门槛高。
这些方法普遍存在操作繁琐、成本高、特异性不足等问题,难以满足大规模样本或临床研究的需求。
Epigentek的MethylFlash 5mC定量ELISA试剂盒(货号P-1030)凭借以下优势成为首选工具:
1.高灵敏度与特异性:基于ELISA技术,利用特异性抗体直接检测5mC,无需复杂的预处理步骤。实验数据显示,其线性范围可达0.1-1% 5mC,R?值超过0.9,确保检测结果的准确性。
2.操作简便与成本效益:仅需100 ng DNA即可完成检测,试剂盒设计符合微量板格式,适合高通量筛选。相比传统方法,ELISA的试剂成本更低,且可快速完成定量分析。
3.广泛适用性:适用于检测从任意物种(包括哺乳动物、植物、真菌、细菌、病毒)提取的 DNA 的整体甲基化水平,样本形式涵盖但不限于培养细胞、新鲜或冷冻组织、石蜡包埋组织、血浆/血清及体液样本。片段长度 200 bp 至完整基因组的单链或双链 DNA 均可兼容。
4.文献支持与市场认可:该试剂盒被广泛引用(事实远不止88篇,目前统计引用文献已超300)。此外,与其他商业试剂盒(如Zymo Research的5-mC ELISA Kit等)相比,Epigentek的MethylFlash 5mC定量ELISA试剂盒(货号P-1030)在DNA片段大小依赖性误差控制上表现出更强的稳定性,这使得其在复杂样本(如肿瘤组织或干细胞)中的应用更具优势。
Epigentek MethylFlash 5mC定量ELISA试剂盒(货号P-1030)的应用场景涵盖多个领域:
1.癌症研究:在肿瘤细胞中,5mC的异常积累可能导致抑癌基因沉默。通过该试剂盒检测5mC水平,可辅助评估肿瘤进展和治疗反应。例如,髓系恶性肿瘤中5mC的动态变化可通过ELISA实时监测。
2.神经科学:5mC在脑细胞(如浦肯野细胞)中的高丰度提示其在神经元功能调控中的作用。该试剂盒可用于分析5mC在神经退行性疾病中的变化。
3.生殖医学:在精子DNA中,5mC的异常模式可能与遗传疾病相关。该试剂盒可帮助解析生殖细胞中的甲基化特征。
4.环境健康研究:通过检测5mC水平,可评估环境因素(如化学诱导剂)对表观遗传的干扰。例如,缺氧条件下的5mC变化可通过ELISA快速量化。
Epigentek的MethylFlash 5mC定量ELISA试剂盒(货号P-1030)凭借其高灵敏度、操作简便性和广泛适用性,成为表观遗传研究的理想工具。无论是基础研究还是临床应用,该试剂盒都能高效支持5mC的定量分析,为揭示DNA甲基化机制和疾病干预提供关键数据支持。选择该试剂盒,不仅能够简化实验流程,还能提升研究效率,助力科学突破。艾美捷作为Epigentek的中国区独家代理,已为您备妥EpigentekEpigentek的MethylFlash 5mC定量ELISA试剂盒(货号P-1030)的完整中文说明书,助您轻松上手,为科研之路扫清障碍、加速前行!
微信扫码在线客服