MeDIP 是一种全基因组范围的、大规模的技术,通过使用 5 - 甲基胞嘧啶抗体分离甲基化 DNA 片段来富集甲基化 DNA。这项技术在帮助识别癌症等疾病中异常甲基化的基因方面发挥了重要作用。借助 MeDIP,可以通过 PCR 确定免疫沉淀的甲基化 DNA 片段,以评估特定区域的甲基化状态。此外,纯化的片段可以用于高通量 DNA 检测方法,如 DNA 微阵列(MeDIP - chip)和下一代测序(MeDIP - seq),成为一种用于甲基化组水平分析以及在全基因组范围内开发 DNA 甲基化全面分析的有用方法。
Methylamp 甲基化 DNA 捕获(MeDIP)试剂盒是一套经过优化的试剂,用于在便捷的微孔板格式中富集和捕获甲基化 DNA 片段。该方法,即甲基化 DNA 免疫沉淀(MeDIP),使用特异性针对 5 - 甲基胞嘧啶的单克隆抗体免疫沉淀甲基化基因组 DNA。富集的甲基化片段随后可用于全基因组范围的基因特异性 DNA 甲基化分析。Methylamp 甲基化 DNA 捕获试剂盒适用于将富集的甲基化 DNA 的特异性与定性和定量 PCR、传统测序和下一代测序、DNA 微阵列以及 Southern 印迹相结合。
艾美捷甲基化DNA捕获(MeDIP)试剂盒(#P-1015-24)优势与特点:
1、高效富集甲基化DNA:> 98%。
2、极快的操作流程,可在 3 小时内完成。
3、条带式微孔板格式使检测灵活:手动或高通量。
4、包含用于 DNA 纯化的柱子,节省时间并减少劳动强度。
5、与所有基于 DNA 扩增的方法兼容。
6、简单、可靠且一致的检测条件。
原理与操作流程:
MeDIP 最常见且关键的实验因素,可能会影响其准确性,涉及在程序中使用的 5 - 甲基胞嘧啶抗体的质量和交叉反应性。Epigentek 通过广泛的研究和开发克服了这一限制,通过应用一种非交叉反应性的 5mC 抗体,创建了一种高效的 MeDIP 试剂盒。在试剂盒的检测中,DNA 被剪切,然后加入到微孔板的一个孔或多个孔中(高通量格式)。然后使用一种特异性针对甲基胞嘧啶的高质量 ChIP/MeDIP 级抗体在孔中捕获甲基化 DNA。抗体捕获的甲基化 DNA 被释放,并最终通过包含的离心柱进行纯化。洗脱的甲基化 DNA 现在可用于各种下游应用。
图:使用 MCF - 7 细胞的基因组 DNA(0.5 ?g)作为起始材料,在微孔中富集甲基化 DNA。甲基化 DNA 被固定在微孔中的 5mC 抗体捕获。
文献引用:
Kowluru RA et. al. (April 2025). DNA methylation of long noncoding RNA cytochrome B in diabetic retinopathy. Noncoding RNA Res. 11:141-149.
Dhar S et. al. (March 2025). FOXP3 Transcriptionally Activates Fatty Acid Scavenger Receptor CD36 in Tumour-Induced Treg Cells. Immunology. 174(3):296-309.
Yang C et. al. (February 2025). The Diminution of R-Loops Generated by LncRNA DSP-AS1 Inhibits DSP Gene Transcription to Impede the Re-Epithelialization During Diabetic Wound Healing. Adv Sci (Weinh). :e2406021.
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