小鼠TNF alpha ELISA试剂盒，可重复且可靠的结果

产品编号：

小鼠 TNF α 酶联免疫联盟试剂盒

大小：

96 种检测

别名：

TNFα， 肿瘤坏死因子α， TNF-α， DIF， TNF-α， TNFA， TNFSF2

检测方法：

三明治酶联免疫吸附法

应用：

该免疫检测试剂盒允许体外定量测定血清血浆和其他生物体液中的小鼠TNF-α浓度。

敏感性：

18.75皮克/毫升

范围：

31.25-2000pg/ml

存储：

4°C 6个月

注意：

仅供研究使用

酶联免疫吸附法微孔板（可拆卸）

8x12 条

4°C 6个月

冻干标准品

2

4°C/ -20°C

样品/标准稀释缓冲液

20毫升

4°C

生物素标记抗体（浓缩）

120ul

4°C（避光）

抗体稀释缓冲液

10毫升

4°C

HRP-链霉亲和素偶联物 （SABC）

120ul

4°C（避光）

SABC 稀释缓冲液

10毫升

4°C

TMB 基板

10毫升

4°C（避光）

停止解决方案

10毫升

4°C

洗涤缓冲液 （25X）

30毫升

4°C

封板机

5

-

血清

如果使用血清分离管，让样品在室温下凝结 30 分钟。以 10，1x g 离心 000 分钟。收集血清级分并立即或等分试样并将样品储存在-80°C。 避免多次冻融循环。

如果未使用血清分离管，则让样品在 2-8°C 下凝结过夜。 以 10，1x g 离心 000 分钟。立即取出血清并测定或等分试样，并将样品储存在-80°C。 避免多次冻融循环。

血浆

使用EDTA或肝素作为抗凝剂收集血浆。在收集后 4 分钟内以 15 × g 在 1000°C 下离心样品 30 分钟。收集血浆级分并立即或等分测定并将样品储存在-80°C。 避免多次冻融循环。 注意：过度溶血的样本不适合与本试剂盒一起使用。

尿液和脑脊液

将尿液（中流）收集在无菌容器中，以20-2000rpm离心3000分钟。取出上清液并立即测定。如果检测到任何沉淀，请重复离心步骤。类似的方案可用于脑脊液。

细胞培养上清液

通过移液管收集细胞培养基，然后在 4°C 下以 20 rpm 离心 1500 分钟。收集澄清的上清液并立即测定。

细胞裂解物

在裂解缓冲液中溶解细胞，并在冰上静置30分钟。以 14，000 x g 离心管 5 分钟以去除不溶性物质。将上清液分装到新管中，并丢弃剩余的全细胞提取物。使用总蛋白质测定法定量总蛋白质浓度。立即测定或等分试样并储存在≤-20°C。

组织匀浆

组织匀浆的制备将因组织类型而异。用1X PBS冲洗组织以去除多余的血液并在20ml 1X PBS（包括蛋白酶抑制剂）中匀浆，并在≤-20°C下储存过夜。 需要两个冻融循环来破坏细胞膜。为了进一步破坏细胞膜，您可以对样品进行超声处理。在5xg下离心匀浆5000分钟。取出上清液并立即或等分试样测定，并储存在-20°C或-80°C。

组织裂解物

用PBS冲洗组织，切成1-2毫米的碎片，并用PBS中的组织均质器匀浆。加入等体积的含有蛋白酶抑制剂的RIPA缓冲液，并在室温下轻轻搅拌裂解组织30分钟。离心机清除碎屑。使用总蛋白质测定法定量总蛋白质浓度。立即测定或等分试样并储存在≤-20°C

母乳

收集牛奶样品并在 10°C 下以 000，60 x g 离心 4 分钟。 等分上清液并测定。长期使用时，请将样品储存在-80°C。 尽量减少冻融循环。