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KA2461-KLH IgM(小鼠)ELISA试剂盒:适用于血浆和血清样本的高效检测

发布者:艾美捷科技    发布时间:2025-01-13     
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KLH IgM(小鼠)ELISA试剂盒:KLH IgM(小鼠)ELISA试剂盒用于定量测量血浆和血清中的KLH IgM。

 

艾美捷KLH IgM(小鼠)ELISA试剂盒

货号:KA2461

校准范围:6.25至100 ?g/mL

适用样本:血浆、血清

样本体积:100 ?L

标记:HRP结合物

检测方法:比色法

监管状态:仅供研究使用(RUO)

测定类型:定量

反应性:小鼠

应用:定量

储存说明:将冻干标准品储存于-20℃。将所有其他组分储存于4℃。

仅供研究使用(RUO)

 

KLH IgM(小鼠)ELISA试剂盒检测原理:

KLH IgM(小鼠)ELISA试剂盒基于固相酶联免疫吸附试验(ELISA)。该测定使用KLH进行固相(微量滴定孔)固定和辣根过氧化物酶(HRP)偶联用于检测抗小鼠IgM抗体。将测试血清或血浆样本稀释并在微量滴定孔1小时。随后洗涤微量滴定孔,加入HRP缀合物孵育45分钟。因此,抗KLH IgM分子夹在固定的KLH和检测抗体偶联物。然后洗涤孔以去除未结合的HRP标记抗体,以及加入TMB试剂,在室温下孵育20分钟。这导致了蓝色。通过添加终止溶液来停止显色;将颜色更改为黄色。光学在450nm处用分光光度法测量密度。抗KLH IgM的浓度与测试样品的光密度。

 

使用注意事项:

? 仅供研究使用,不用于诊断目的。

? 在使用试剂盒之前,请仔细阅读并理解说明书。

? 本试剂盒设计用于测量免疫后5天收集的血清中的抗KLH IgM水平。免疫后超过5天收集的血清可能含有高水平的抗KLH IgG,这些IgG会与抗KLH IgM竞争固定化的KLH,从而造成干扰。

? 所有试剂在使用前应放置至室温(25℃)。

? 应通过实验确定最佳样本稀释度。然而,我们建议初次稀释样本500倍。请勿使用小于25倍的稀释度。

? 如果在每个步骤中,试剂在5分钟内加入微孔板的孔中,则可获得最佳结果。

? 操作限制

? 当按照上述详细说明完整理解并执行测定程序时,将获得可靠且可重复的结果。

? 洗涤步骤至关重要。洗涤不足会导致精密度差和吸光度读数虚高。

 

试剂准备:

? 洗涤液准备

提供的洗涤液为20倍浓缩液。使用前,将瓶中内容物(50 mL)用950 mL蒸馏水或去离子水稀释。

? 标准品准备

小鼠抗KLH IgM标准品为冻干储备液。按照瓶签上的说明复溶储备液。

标记5个聚丙烯或玻璃管,分别为100、50、25、12.5和6.25 ?g/mL。

按照储备瓶标签上的详细说明,在标记为100 ?g/mL的管中准备100 ?g/mL的标准品。

将稀释液250 ?L分别加入剩余的管中。

通过将100 ?g/mL标准品250 ?L与标记为50 ?g/mL的管中的250 ?L稀释液混合稀释,制备50 ?g/mL的标准品。

同样通过连续稀释法制备25、12.5和6.25 ?g/mL的标准品。

 

样本准备:

一般说明:抗KLH IgM存在于KLH免疫小鼠的血清中,浓度约为10,000 ?g/mL。为了获得在标准曲线范围内的数值,我们建议样本初次稀释500倍,使用以下程序对每个待测样本进行操作:

分别向不同的管中加入48 ?L和237.5 ?L稀释液。

将2 ?L血清/血浆样本加入含有48 ?L稀释液的管中,混匀。这提供了25倍稀释的样本。

将12.5 ?L 25倍稀释的样本与第二管中的237.5 ?L稀释液混合。这提供了样本的500倍稀释。

对每个待测样本重复此程序。

 

典型标准曲线:

下图展示了以450 nm处的吸光度读数为Y轴,抗KLH IgM浓度为X轴的典型标准曲线。该曲线仅用于说明目的,不应用于计算未知数。

以450 nm处的吸光度读数为Y轴,抗KLH IgM浓度为X轴的典型标准曲线

 

KLH IgM(小鼠)ELISA试剂盒文献参考:

1. Low-dose influenza vaccine Grippol Quadrivalent with adjuvant Polyoxidonium induces a T helper-2 mediated humoral immune response and increases NK cell activity. Vladimir Talayev, Irina Zaichenko, Maria Svetlova, Alexei Matveichev, Olga Babaykina, Elena Voronina, Andrei Mironov. Vaccine. 2020 Sep 29;38(42):6645-6655. doi:10.1016/j.vaccine.2020.07.053.

2. Pancreatic lipase-related protein 2 is responsible for the increased hepatic retinyl ester hydrolase activity in vitamin A-deficient mice. Gao Y, Lu W, Sun Q, Yang X,Liu J, Ge W, Yang Y, Zhao Y, Xu X, Zhang J. FEBS J.2019 Jun 14. [Epub ahead of print]


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