Abnova Cxcl10（大鼠）ELISA试剂盒检测原理&结果计算

大鼠IP-10，即10 kDa干扰素-γ诱导蛋白，也称为C-X-C基序趋化因子10，是一种由位于14号染色体14p22位点的Cxcl10基因编码的98个氨基酸的细胞因子蛋白。在初始合成后，21个氨基酸的信号序列从N端区域被移除，使得77个氨基酸的IP-10蛋白能够正确折叠并成熟。IP-10是一种促炎细胞因子，能够诱导血管平滑肌细胞中的DNA合成、细胞增殖和细胞迁移。除了作为促炎细胞因子的作用外，IP-10可能还通过癌基因Ras和血清生长因子的诱导参与T细胞效应功能，甚至可能参与T细胞的发育；癌基因诱导是持续性的，而血清诱导则是短暂的。  

作为Abnova全国总代理，艾美捷科技强烈推荐Abnova热销产品Cxcl10（大鼠）ELISA试剂盒。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

Cxcl10（大鼠）ELISA试剂盒检测原理：

Cxcl10（大鼠）ELISA试剂盒包含用于定量检测自然或重组大鼠IP-10浓度的必要组分，适用于包括上清液、血清和血浆在内的任何实验样本。这种特定的免疫分析采用“夹心”酶联免疫吸附测定（ELISA）的定量技术，其中目标蛋白（抗原）以“夹心”形式被预先包被在每个孔底的初级捕获抗体和随后由研究者添加的次级检测抗体所结合。

每个孔底包被的捕获抗体针对大鼠IP-10上的特定表位，而用户添加的检测抗体则结合到被捕获目标蛋白上的表位。在操作的每一步骤中，都需要进行一系列洗涤步骤，以确保消除蛋白质之间或蛋白质与固相之间的非特异性结合。

在目标抗原孵育和“夹心”形成后，辣根过氧化物酶通过与次级抗体的恒定重链结合（无论是通过共价键还是通过生物素-链霉亲和素相互作用），在加入底物后可以引发比色反应。当加入底物TMB（3,3',5,5'-四甲基联苯胺）时，由过氧化物酶催化的反应产生蓝色，代表抗原浓度。

在颜色充分发展后，可以通过加入终止液（2 N硫酸）来终止反应，溶液颜色将变为黄色。然后可以通过分光光度计读取每个孔的吸光度，从而生成标准曲线并随后确定蛋白浓度。

标准曲线：

注意：标准曲线仅用于说明目的，不应用于计算未知样本浓度。每次进行实验时都应生成新的标准曲线。

结果计算：

计算每个标准品、对照品和样本的重复或三重复读数的平均值，并减去零标准的平均吸光度值。使用Microsoft Excel或其他能够建立四参数逻辑（4-PL）曲线拟合的计算机软件生成标准曲线。如果使用Excel或其他绘图工具，将平均吸光度值（以吸光度单位表示，y轴）与已知标准品浓度（以pg/ml表示，x轴）进行绘制。仅使用能够建立明显梯度的值。之后，通过回归分析在绘制的点之间生成最佳拟合曲线或“趋势线”。

Abnova生产的所有产品，包括重组蛋白和抗体均采用目前国际上最先进的生产和SPF级动物设施。Abnova引进CFS先进的麦胚无细胞蛋白合成系统及独有的全自动蛋白纯化技术，向全球蛋白质学客户提供最高品质的重组蛋白产品。Abnova通过与欧洲的分子生物学实验室（EMBL，Eurpean Molecular Biology Laboratory）共同开发的单克隆抗体生产系统，包括高通量的抗原准备、多位点免疫、自动融合与筛选分析。其中MaxPab技术是Abnova专利的能双重识别平面线性蛋白及三维空间结构上接近的蛋白的抗体技术，非常适合用于免疫学检测，MaxPab抗体以真核表达的全长蛋白作为免疫原，制备纯化而来，具有非常高的免疫识别功能，同时后继的纯化技术也保证了极高的特异性，非常适合免疫学检测。