大鼠IgE ELISA试剂盒是一种高灵敏度的双位点酶联免疫吸附测定(ELISA),用于测量大鼠生物样本中的IgE。如果ELISA用于超出预期用途的其他目的,用户可能需要对其进行优化。
作为Abnova全国总代理,艾美捷科技强烈推荐Abnova热销产品IgE(大鼠)ELISA试剂盒。产品仅用于科研,不可用于临床诊断。
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IgE(大鼠)ELISA试剂盒 | KA1951 | 查看 |
IgE(大鼠)ELISA试剂盒检测原理:
双抗体夹心ELISA的原理如图1所示。在此检测中,样本中的IgE会与吸附在聚苯乙烯微量滴定板孔表面的抗IgE抗体发生反应。在通过洗涤去除未结合的蛋白质后,加入与辣根过氧化物酶(HRP)偶联的抗IgE抗体。这些酶标记的抗体与之前结合的IgE形成复合物。经过另一次洗涤步骤后,通过加入显色底物3,3',5,5'-四甲基联苯胺(TMB)来测定吸附在免疫吸附剂上的酶。结合酶的量与样本中IgE的浓度成正比;因此,450nm处的吸光度是测试样本中IgE浓度的量度。可以通过从标准曲线中插值来确定测试样本中IgE的量,并根据样本稀释进行校正。
所需材料(但未提供)
-精密移液管(2μL至100μL),用于制备和分配稀释液
-试管
-挤瓶或微量滴定板洗涤/抽吸器
-蒸馏水或去离子水
-微量滴定板读数仪
-用于制备试剂和缓冲液的各种玻璃器皿
-用于样本收集的离心机
-用于血浆收集的抗凝剂
-计时器
结果计算
1.从每个样本的测试值中减去平均背景值(标准零的平均吸光度读数)。
2.对每个标准品的重复读数取平均值,并使用结果构建标准曲线。通过使用能够生成四参数逻辑曲线拟合的计算机软件来处理数据,构建标准曲线。也可以使用二次多项式(二次)或其他曲线拟合;然而,它们对数据的拟合精度较低。
3.从标准曲线中插值测试样本值。根据血清稀释因子进行校正,以确定原始样本中的IgE浓度。
标准曲线:
标准曲线仅用于说明目的,不应用于计算未知样本。每次进行检测时都应生成新的标准曲线。
Abnova生产的所有产品,包括重组蛋白和抗体均采用目前国际上最先进的生产和SPF级动物设施。Abnova引进CFS先进的麦胚无细胞蛋白合成系统及独有的全自动蛋白纯化技术,向全球蛋白质学客户提供最高品质的重组蛋白产品。Abnova通过与欧洲的分子生物学实验室(EMBL,Eurpean Molecular Biology Laboratory)共同开发的单克隆抗体生产系统,包括高通量的抗原准备、多位点免疫、自动融合与筛选分析。其中MaxPab技术是Abnova专利的能双重识别平面线性蛋白及三维空间结构上接近的蛋白的抗体技术,非常适合用于免疫学检测,MaxPab抗体以真核表达的全长蛋白作为免疫原,制备纯化而来,具有非常高的免疫识别功能,同时后继的纯化技术也保证了极高的特异性,非常适合免疫学检测。
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