LDN-IL-1βELISA（RUO）试剂盒：优化的实验设计用于精确测量

人类白细胞介素-1（IL-1）是宿主对各种感染性、炎症性和免疫学挑战反应的关键介导因子。两种不同的多肽，即IL-1α和IL-1β，介导IL-1的生物活性，并且都与相同的细胞表面受体结合。它们最初被合成为31-kDa的细胞内前体，随后在单核细胞上清液中作为17-kDa的成熟蛋白被发现。也已经描述了膜结合的IL-1，这可能是IL-1介导的局部效应的一部分。IL-1的主要来源是血液单核细胞和组织巨噬细胞。其他特殊细胞，如T细胞和B细胞、各种上皮细胞、内皮细胞以及一些间充质细胞，也能产生IL-1。IL-1β是由单核细胞和巨噬细胞分泌的主要形式，人们认为它们是循环（血浆）IL-1的主要来源。在血浆和其他生物液体中已经描述了对IL-1活性的抑制。IL-1影响几个无关的组织，并且是“急性期”炎症反应的主要介导因子，这些反应以代谢、内分泌和免疫功能的改变为特征。这种细胞因子在T细胞激活中具有重要作用，提供了IL-2（T细胞生长因子）产生的必需信号之一。它是通过作用于神经系统（发热、睡眠、厌食）、骨髓来源的细胞（中性粒细胞、单核细胞和淋巴细胞的趋化和/或激活）以及各种组织（成纤维细胞增殖、软骨和骨基质的吸收、胶质细胞增殖、刺激内皮细胞的促凝血活性等）来介导炎症过程的主要因子。

艾美捷LDN-IL-1βELISA（RUO）试剂盒（ILE-3000R）：

名称：IL-1β酶联免疫分析法（ELISA）

描述：

用于人血清和血浆中白介素1β（IL-1β）的定量测量的酶免疫分析法。

设计：ELISA

样本体积：

200微升血清或血浆

总测定时间：2小时15分钟

标准范围：0/24 – 1,166皮克/毫升

灵敏度：0.35皮克/毫升

储存条件：2 – 8摄氏度

试剂盒：96次测定

CE认证：是

LDN-IL-1βELISA（RUO）试剂盒检测原理：

IL-1β酶联免疫分析法（ELISA）是一种在微孔板（microtiterplate）上进行的固相酶放大灵敏度免疫分析法。该分析法使用针对IL-1β不同表位的单克隆抗体（MAbs）。校准品和样本与涂覆在微孔板孔上的捕获单克隆抗体（MAb 1）反应，并与标记有辣根过氧化物酶（HRP）的单克隆抗体（MAb 2）反应。在孵育一段时间后，形成三明治结构：包被的MAb 1 – 人IL-1β – MAb 2 – HRP，随后洗涤微孔板以去除未结合的酶标记抗体。通过显色反应测量结合的酶标记抗体。加入显色溶液（TMB）并孵育。通过添加停止液来停止反应，然后在适当的波长下读取微孔板。通过比色法测量吸光度来确定底物转化量，该吸光度与IL-1β浓度成正比。绘制校准曲线，并通过校准曲线插值确定样本中的IL-1β浓度。使用ELISA读取器（线性范围高达3个OD单位）和先进的数据简化方法（多色数据简化），在低范围内实现了高灵敏度，并扩展了校准范围。

LDN-IL-1βELISA（RUO）试剂盒结果的计算：

1 多色读数

1. 在这种情况下，软件将进行数据处理。

2. 首先，使用650纳米（或630纳米）的参考滤光片，在450纳米处读取板。

3. 然后，使用相同的参考滤光片，在490纳米处进行第二次读数。

4. 软件将自动驱动读取器，并将两次读数整合到多色模型中。该技术可以生成高达10.5的OD值。

5. 多色数据处理的原理如下：

Xi = 450纳米处的OD值

Yi = 490纳米处的OD值

使用标准无加权线性回归，计算参数A和B：Y = A*X + B

如果Xi < 3个OD单位，则计算的X = Xi

如果Xi > 3个OD单位，则计算的X = (Yi-B)/A

使用4参数逻辑曲线拟合来构建校准曲线。

通过在校准曲线上插值，确定样本中IL-1β的浓度。

2 双色读数

1. 使用设置在650纳米（或630纳米）的参考滤光片，在450纳米处读取板。

2. 计算重复测定的两次读数的平均值。

3. 在半对数或线性坐标纸上，将每个校准品的OD值（纵坐标）与其相应的IL-1β浓度（横坐标）绘制出来，并用直线连接绘制的点，通过校准点绘制校准曲线。

4. 通过在校准曲线上插值，读取每个对照品和样本的浓度。

5. 计算机辅助数据简化将简化这些计算。如果使用自动结果处理，建议使用4参数逻辑函数曲线拟合。

LDN Labor Diagnostika Nord GmbH & Co. KG（简称LDN）旨在开发、制造和向临床和研究实验室市场提供专业的体外诊断测试系统和创新技术。艾美捷科技是LDN Labor Diagnostika Nord的中国代理商，为科研工作者提供优质的产品与服务。