人FXN(Frataxin)ELISA试剂盒专为精确测量人样本(包括血清、血浆和细胞培养上清液)中的Frataxin水平而设计。该试剂盒具有卓越的灵敏度和特异性,能够为各种研究应用提供准确且一致的结果。
Frataxin是一种关键蛋白,参与调节铁代谢和线粒体功能,对细胞整体健康至关重要。Frataxin水平失调与多种疾病相关,包括弗里德赖希共济失调症(一种以进行性肌肉无力和协调障碍为特征的神经退行性疾病)。
通过准确定量Frataxin水平,研究人员可以获得这些疾病病理生理学的宝贵见解,并可能识别新的治疗靶点。人FXN ELISA试剂盒是研究与Frataxin相关疾病并推动这些疾病治疗开发的宝贵工具。
作为Assay Genie全国总代理,艾美捷科技强烈推荐Assay Genie热销产品人FXN(Frataxin)ELISA试剂盒。产品仅用于科研,不可用于临床诊断。
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人FXN(Frataxin)ELISA试剂盒 | HUES02636 | 查看 |
人FXN(Frataxin)ELISA试剂盒:
检测类型:夹心法
规格:96次检测
检测时间:4.5小时
反应性:人
检测方法:比色法
检测范围:23.44 - 1500 pg/mL
灵敏度:14.06 pg/mL
每孔所需样本体积:100uL
样本类型:血清、血浆及其他生物液体
特异性:该试剂盒可识别样本中的人FXN。未观察到人FXN与其类似物之间存在显著的交叉反应或干扰。
试剂盒原理
该ELISA试剂盒采用夹心ELISA方法。试剂盒中提供的微孔ELISA板已预先涂有一抗人FXN特异性的抗体。将标准品或样本加入适当的微孔ELISA板孔中,与特异性抗体结合。随后依次向每个微孔板中加入针对人FXN的生物素标记检测抗体和链霉亲和素-辣根过氧化物酶(HRP)结合物,并进行孵育。洗去未结合的成分后,向每个孔中加入底物溶液。只有含有人FXN、生物素标记检测抗体和链霉亲和素-HRP结合物的孔才会呈现蓝色。通过加入终止液终止酶-底物反应,颜色变为黄色。在450 nm ± 2 nm波长处通过分光光度法测量吸光度(OD值)。OD值与人FXN的浓度成正比。通过将样本的OD值与标准曲线进行比较,可以计算出样本中人FXN的浓度。
精密度
批内精密度(同一检测内的精密度):分别在一块板上对低、中、高三个水平的人FXN样本进行20次检测。
批间精密度(不同检测间的精密度):分别在三块不同的板上对低、中、高三个水平的人FXN样本进行检测,每块板20次重复。
操作步骤
在预包被的微孔板上设置标准品、测试样本和对照(零)孔,并记录它们的位置。建议每个标准品和样本均进行双份测量。注意:将所有溶液加入孔底,避免与孔壁接触。加入孔中时确保溶液不起泡。
向标准孔中加入100uL的标准品溶液。
向对照(零)孔中加入100uL的样本/标准品稀释缓冲液。
向测试样本孔中加入100uL适当稀释的样本(血清、血浆、组织匀浆及其他生物液体)。
用试剂盒提供的封板膜覆盖微孔板,并在37°C孵育90分钟。
吸去每个孔中的液体,不要洗涤。立即向每个孔中加入100?L生物素标记检测抗体工作液。用封板膜覆盖微孔板并轻轻混合。在37°C孵育1小时。
吸去或倾倒微孔板中的溶液,向每个孔中加入350?L洗涤缓冲液,并在室温下孵育1-2分钟。吸去每个孔中的溶液,并将微孔板在吸水滤纸上拍干。重复此过程3次。注意:此步骤及其他洗涤步骤可使用微孔板洗涤仪。
向每个孔中加入100uL HRP结合物工作液。用封板膜覆盖并孵育30分钟。
吸去或倾倒微孔板中的溶液。重复步骤7中的洗涤过程5次。
向每个孔中加入90uL底物试剂。用新的封板膜覆盖并孵育约15分钟。避光。注意:根据实际颜色变化,反应时间可以缩短或延长,但不超过30分钟。
向每个孔中加入50uL终止液。注意:加入终止液的顺序应与加入底物溶液的顺序相同。
立即使用450 nm波长的微孔板读数仪测定每个孔的吸光度(OD值)。
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