产品概述
由艾美捷代理Hycult推出的大鼠替代补体途径检测试剂盒,货号:HIT412,是一款用于检测大鼠替代补体途径活性的酶联免疫吸附检测试剂盒(ELISA)。该产品通过脂多糖(LPS)介导的途径激活来测定替代补体途径的功能活性,适用于血清和血浆样本中补体系统激活水平的体外定性/半定量分析。补体系统缺陷或其他补体相关缺陷可通过分别或平行运行各途径的检测试剂盒进行便捷筛查。
补体系统背景
先天免疫系统在机体抵御外来病原体的第一道防线中发挥重要作用,而补体系统是这一反应的核心组成部分。补体系统由一系列复杂的蛋白质和受体家族构成,广泛存在于循环系统,组织及其他体液中,并与适应性免疫系统存在多重关联。
补体系统包含三条明确的激活途径:经典途径,凝集素途径和替代途径。这单条途径通过各自特定的分子面板被激活,并以级联方式通过一系列蛋白质的蛋白水解切割依次推进,生成具有多种生物活性的活化产物,这些产物通过与特定细胞受体及其它血清蛋白相互作用介导多种生物学功能。三条途径最终汇聚于中心组分C3,激活后形成C3a和C3b,进而启动末端补体途径,最终形成末端补体复合物(TCC,即C5b-9)。
经典途径由C1q与抗体复合物结合而启动;替代途径和凝集素途径则以非抗体依赖方式激活,分别通过补体组分与病原体表面的特定碳水化合物基团和脂多糖(LPS)相互作用而触发。此外,替代途径还充当其他途径的放大环路。在特定条件下,补体系统可能对宿主产生不利影响,导致自身免疫性疾病和感染等病理状态。
临床相关性
补体系统异常与多种疾病密切相关。例如,C3缺陷与系统性红斑狼疮(SLE)相关;替代途径的异常(如备解素或纤维胶凝蛋白缺陷)会增加感染的易感性;甘露糖结合凝集素(MBL)作为凝集素途径的主要组分,与细菌、真菌和病毒感染相关。因此,准确评估补体途径活性对于相关疾病的研究和诊断具有重要意义。
检测原理
HIT412 采用即用型固相酶联免疫吸附检测(ELISA)格式,基于夹心法原理,工作时间为3.5小时。试剂盒采用12条可拆卸8孔微孔板条设计,允许用户根据实验需求灵活选择批次规模。
检测流程如下:样本和阳性对照在包被有LPS的微孔中孵育;生物素化追踪抗体与结合的样本和对照结合;链霉亲和素-过氧化物酶偶联物与生物素化追踪抗体结合;链霉亲和素-过氧化物酶与底物四甲基联苯胺(TMB)反应;加入草酸终止酶反应;在450 nm波长处用分光光度计测定吸光度。
产品特性与使用建议
阳性对照说明:试剂盒包含基于Wistar品系的阳性对照,可用作过程控制,确保替代补体级联反应完全运行。但该阳性对照不能用于确定批次间的激活水平差异。
实验设计建议:建议在研究纳入自己的参考样本(100%补体活性)和阴性对照(如未保存的活化血清),以确定样本的激活水平。需要注意的是,补体活性水平具有大鼠品系依赖性,并可能受样本采集和处理方式的影响。
产品规格:
产品类型:检测试剂盒
规格:1×96孔
工作体积:100 ul/孔
种属:大鼠
别名:AP,替代途径
储存条件:4°C保存,推荐条件下稳定至少6个月
注意事项:本产品仅供研究使用,不得用于人体或动物体内,也不得用于诊断目的。
应用领域
本产品适用于血清和血浆样本中替代补体途径激活水平的体外测定,可应用于感染性疾病和肾病学等相关研究领域。通过平行或分别运行各补体途径的检测,可便捷地筛查补体缺陷及其他补体系统异常。

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