细胞表面波形蛋白（CSV）单克隆抗体，免固定，免透化活细胞免疫荧光方案

产品概述

由艾美捷代理Abnova推出的细胞表面波形蛋白（CSV）单克隆抗体（货号：H00007431-M08）为小鼠源IgG2b kappa型单克隆抗体，特异性识别人细胞表面波形蛋白（Cell-Surface Vimentin, CSV）。波形蛋白作为中间丝蛋白家族成员，在肿瘤细胞上皮-间质转化（EMT）过程中发生膜转位，成为极具潜力的肿瘤诊断与治疗靶点。该抗体（克隆号84-1）系MD安德森癌症中心专利技术成果，已独家授权至Abnova公司。

产品基本属性

项目 | 规格

免疫原 | 人重组波形蛋白

宿主 | 小鼠

反应性 | 人

种属交叉反应序列 | 小鼠（100%）；大鼠（100%）

形态 | 液体

亚型 | IgG2b, kappa

保存缓冲液 | 1x PBS, pH 7.4

保存条件 | -20°C或更低温度保存，分装使用以避免反复冻融

核心应用场景与操作要点

1. 免疫荧光检测（IF）

该抗体在免疫荧光染色中的核心优势在于无需固定与透膜处理，可直接识别活细胞表面天然构象的CSV蛋白。

推荐方案：对未固定、未透化的MDA-MB-231乳腺癌细胞进行染色，采用FITC标记的CSV单抗（绿色）与DAPI核染（蓝色）共标，可获得清晰的膜定位信号。

关键提醒：若实验设计必须进行固定处理，须使用Abnova专用固定液（Special Fixative），常规多聚甲醛或甲醇固定可能导致抗原表位破坏，产生假阴性结果。

2. 流式细胞术（FCM）

该抗体适用于对活细胞表面CSV表达水平的定量分析。

应用实例：在癌症细胞系与正常细胞系的对比检测中，以同型对照为阴性参照，可有效区分CSV在肿瘤细胞表面的高表达特征（Satelli A.等，Clinical Cancer Research 2014;21(4):899-906）。

操作建议：全程保持细胞存活状态，染色前避免胰酶过度消化损伤膜蛋白。

3. 蛋白免疫印迹（WB）

该抗体可识别细胞裂解液中总波形蛋白表达。

应用实例：在MCF-7细胞裂解物中可检测到特异性条带。

重要技术注意事项

1. 最适用途：本产品最核心价值在于检测天然状态的细胞表面波形蛋白，建议优先用于活细胞染色实验（IF、FCM）。

2. 固定限制：常规固定/透化步骤会破坏CSV抗原表位，必须避免。如固定不可避免，务必使用配套专用固定液。

3. 分装保存：抗体应分装后于-20°C以下保存，避免反复冻融导致活性下降。分装量建议为单次实验用量。

4. 荧光标记选择：直接偶联FITC的形式已可用于单标实验，多色实验请根据流式通道需求选择相应二抗系统。

总结

本产品是目前少有的可直接识别活细胞表面波形蛋白的单克隆抗体工具，在肿瘤循环细胞检测、EMT机制研究及靶向药物开发等领域具有独特应用价值。使用时请严格遵守“不固定、不透化”的核心原则，以确保获得真实可靠的实验结果。

文献参考：

1. Glioblastoma Multiforme Selective Nanomedicines forImproved Anti-Cancer Treatments. Jason ThomasDuskey, Arianna Rinaldi, Ilaria Ottonelli, RiccardoCaraffi, Chiara Alessia De Benedictis, Ann Katrin Sauer,Giovanni Tosi, Maria Angela Vandelli, Barbara Ruozi,Andreas Martin Grabrucker. Pharmaceutics. 2022 Jul12;14(7):1450. doi: 10.3390/pharmaceutics14071450.

2. Rare osteosarcoma cell subpopulation protein arrayand profiling using imaging mass cytometry andbioinformatics analysis. Izhar S Batth, Qing Meng, QiWang, Keila E Torres, Jared Burks, Jing Wang, RichardGorlick, Shulin Li. BMC Cancer. 2020 Jul 31;20(1):715.doi: 10.1186/s12885-020-07203-7.

3. Circulating tumor cells in whole process managementof gastrointestinal stromal tumor in a real-life setting.Zhang Q, Xu K, Chen M, Miao Y, Wang N, Xu Z, Xu H.Saudi J Gastroenterol. May-Jun 2020;26(3):160-167.doi: 10.4103/sjg.SJG_24_20