All-In-One 5X RT预混液（含gDNA去除），可调孵育条件灵活适配长转录本与高去除需求

一、产品概述：一体化cDNA合成与gDNA去除方案

由艾美捷代理abm公司推出的All-In-One 5X RT预混液（含gDNA去除，货号：G592）是一款便捷的即用型预混液，专为第一链cDNA合成设计，并整合了基因组DNA（gDNA）去除功能。gDNA污染是影响RNA准确定量检测的常见问题，本预混液可在不影响逆转录与第一链cDNA合成的前提下有效解决该问题，使cDNA合成过程更加简便、可靠且具备良好的重复性。产品应于-20°C条件下保存。

二、核心组分：优化配比的即用型反应体系

该5X RT MasterMix经优化配制，包含abm专有的OneScript Hot逆转录酶、RNaseOFF核糖核酸酶抑制剂、温度敏感型DNase、dNTPs，以及精细平衡配比的Oligo (dT)与随机引物（Random Primers）。温度敏感型DNase的引入使gDNA去除与逆转录可在同一反应体系中衔接完成，无需额外开管操作；Oligo (dT)与随机引物的平衡配比则兼顾了poly(A)? mRNA与总RNA模板的逆转录需求，有助于提升cDNA覆盖度与合成效率。由本试剂盒合成的高质量cDNA可广泛用于多种下游应用。

三、操作流程：20 ?l体系两步温控快速完成

反应体系配制需在冰上进行，使用前应将各组分充分解冻并混匀。20 ?l标准反应体系包含：All-In-One 5X RT MasterMix 4 ?l，总RNA或poly(A)? mRNA 1 ng–2 ?g（体积可变），其余以无核酸酶水补足至20 ?l。体系轻柔混匀并短暂离心后，于37°C孵育15分钟，随后于60°C孵育10分钟。可选步骤为95°C加热3分钟终止反应，随后置于冰上冷却。新合成的第一链cDNA可立即用于下游实验，或于-20°C长期保存。

四、使用建议：按需调整孵育条件优化效果

总RNA与poly(A)? mRNA均可用于第一链cDNA合成，但使用poly(A)? mRNA通常可获得更高产量与更优的终产物纯度。若需更高效的gDNA去除，可将37°C孵育时间由推荐的15分钟延长至30分钟；对于较长的转录本，可将60°C孵育时间延长至最多30分钟。对于使用纯RNA、无需去除gDNA的应用场景，可选用OneScript? Hot 5X RT MasterMix（货号G590），以获得更快的操作流程与更高的cDNA合成效率。

五、应用价值：服务多样下游实验需求

本产品将gDNA去除与逆转录整合于单一预混体系中，减少了配液步骤与开管污染风险，适合批量样本的标准化处理。高质量cDNA产物可满足基因表达定量分析等多种下游应用需求，为RNA检测实验提供稳定可靠的前处理保障。使用时请严格按照说明书操作，注意无菌与无核酸酶操作规范，以确保实验结果的准确性与重复性。