Southern Biotech二抗指南

Southern Biotech作为二抗专家，为各位科研学者带来了一份二抗选择指南，再也不用担心在选择二抗的路上迷路啦！

选择一种能够提供良好性能的二抗需要考虑许多因素，包括一抗的特性、样品、应用和检测技术。那么什么是二抗，它是用来做什么的呢？

二抗，是一种用于检测、定位或定量分析一抗的抗体。它能够识别并结合到一抗的恒定区域，从而实现对一抗的标记或检测。

一抗是直接针对目标抗原的抗体，用于识别和结合到样品中的特定抗原。而二抗则是针对一抗的宿主物种或一抗的亚型，用于增强信号或提供检测手段。

二抗在多种免疫检测技术中发挥着关键作用，如免疫印迹（Western Blot）、酶联免疫吸附试验（ELISA）、免疫荧光（Immunofluorescence）和流式细胞术（Flow Cytometry）等。通过与一抗结合，二抗可以帮助放大检测信号，提高检测灵敏度。此外，二抗还可以通过与不同的标记物（如酶、荧光染料或放射性同位素）结合，实现多样化的检测方法。

二抗的使用具有以下优势：

信号放大：由于一个二抗分子可以结合多个一抗分子，从而增加检测信号的强度。

通用性：一种二抗可以与多种针对同一宿主物种的一抗结合，减少了为每个特定抗原准备单独标记抗体的需要。

成本效益：与标记大量的不同一抗相比，使用标记的二抗更为经济。

在选择二抗时，需要考虑以下因素：

宿主物种匹配：二抗必须针对一抗的宿主物种，以确保特异性结合。

亚型特异性：如果一抗是某个特定亚型（如 IgG1、IgG2a 等），则需要选择针对该亚型的二抗。

交叉吸附：为了减少非特异性结合和背景信号，应选择经过交叉吸附处理的二抗，以去除与其他物种蛋白质交叉反应的部分。

标记物类型：根据实验所需的检测方法，选择与合适标记物（如酶、荧光染料等）结合的二抗。

为什么选择二抗应该是一个主要考虑因素？

一个精心挑选制作的二抗可以在您的数据质量上产生巨大差异，通过与一抗高灵敏度和特异性结合来支持一抗的性能。虽然二抗不能补偿性能不佳的一抗，但一个好的一抗-二抗组合应该提供高信号、低背景，并清晰地回答您的科学问题。在本文中，我们将讨论如何选择二抗，涵盖选择过程中应考虑的不同因素。

您的二抗应针对一抗的宿主物种？

由于二抗应结合到一抗的恒定区，而恒定区的序列因物种而异，您需要选择针对一抗宿主物种的二抗。例如，如果您的主要抗体是在小鼠中产生的，您将需要抗小鼠二抗。对于大多数研究，您的二抗可以在除了一抗产生物种的任何物种中产生。以上述情况为例，您可以使用抗小鼠二抗，比如兔抗小鼠二抗或山羊抗小鼠二抗等。

你的二抗应该针对一抗的同型抗体。

因为二抗应该与一抗的固定区域结合，而固定区域的序列取决于一抗的同型，所以你需要选择针对一抗同型的二抗。
例如，如果你的一抗是小鼠IgM，你就需要一种针对小鼠IgM的二抗，即抗小鼠IgM。或者，如果你的一抗多克隆抗体的同型是兔IgG，你将需要一种针对兔IgG的二抗（抗兔IgG）。

免疫球蛋白同型（类别）和亚类

- 免疫球蛋白类别 - IgG、IgM、IgA、IgD、IgE

- 小鼠免疫球蛋白亚类 - IgG1、IgG2a/IgG2c、IgG2b、IgG3

- 人类免疫球蛋白亚类 - IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA1、IgA2

- 大鼠免疫球蛋白亚类 - IgG1、IgG2a、IgG2b、IgG2c

- 仓鼠免疫球蛋白亚类 - IgG1、IgG2、IgG3

- 轻链 - Kappa、Lambda

- 重链 - IgG（γ）、IgM（μ）、IgA（α）、IgD（δ）、IgE（ε）

您的二抗应针对您的样本物种进行交叉吸附（也称为预吸附）

为了最大限度地减少二抗的非特异性、背景结合和交叉反应性，我们建议选择针对样品来源的物种进行交叉吸附/预吸附的二抗。
例如，如果你的样品是人体组织，选择一种交叉吸附了人体免疫球蛋白（Ig）或血清蛋白（SP）的二抗。这将有助于确保你的二抗对人体组织的交叉反应最小。

在某些情况下，您可能需要考虑使用抗体片段（F(ab')2或Fab）

除了全分子二抗，还生产仅含F（ab’）2或Fab片段的二抗。二抗片段在特定情况下是有用的，包括：

免疫组织化学或类似的检测，其中二抗需要渗透到组织中。由于其较小的尺寸，F(ab')2 和 Fab 二抗可以比完整的分子抗体更深地渗透到组织中。

含有 Fc 受体的样本。由于 F(ab')2 和 Fab 二抗缺乏 Fc 区域，它们的使用可以减少含有 Fc 受体的样本中的非特异性结合和背景。

选择与您的分析和检测技术兼容的结合物

检测二抗有许多不同的方法，根据检测技术选择缀合物。对于western blotting和ELISA应用，通常使用酶偶联二抗，如辣根过氧化物酶（HRP）和碱性磷酸酶（AP），两者都可以使用比色法和化学发光平台进行检测。也有板阅读器和成像仪，可以检测共轭到荧光染料的二次（例如，Alexa Fluor?，FITC， TRITC， APC， PE）。

对于流式细胞术或免疫荧光应用，需要与荧光染料偶联的二抗。

了解我们的二抗命名系统

在 SouthernBiotech，我们的二抗命名方式为您提供了在选择二抗时需要了解的关键信息。

SouthernBiotech 拥有大量现成二抗，将使您的检测顺利进行，项目按计划进行。

以支持您的研究成功。如果您没有看到所需的二抗，我们的定制服务团队可以为您制作单克隆和多克隆二抗，并将其与您的检测所需的检测分子结合。