由艾美捷代理Enzo推出的CYTO-ID?自噬检测试剂盒(货号:ENZ-51031),是一款无需转染、可在活细胞中定量监测自噬的检测试剂盒。该试剂盒采用新型染料,能够选择性标记累积的自噬囊泡,快速、特异且定量地监测自噬流,适用于荧光显微镜、流式细胞术和微孔板检测等多种平台。
产品核心优势
本试剂盒的核心优势体现在多个方面:首先,无需转染,操作简便,省去了传统自噬检测中基因修饰的繁琐步骤;其次,检测方案已通过已知自噬抑制剂和激活剂验证,结果可靠;第三,染料具有选择性和全面性,能够区分自噬流与自噬溶酶体积累;第四,对溶酶体的染色极低,显著降低了其他染料常见的背景干扰;第五,兼容高通量筛选,便于大规模筛选自噬激活剂和抑制剂。
检测原理
CYTO-ID自噬检测试剂盒通过一种新型染料选择性标记累积的自噬囊泡,从而测量自噬泡并监测溶酶体抑制的活细胞中的自噬流。该染料为488 nm可激发的绿色荧光染料,经过优化设计,引入了可滴定功能基团,使其在掺入前自噬体、自噬体和自噬溶酶体时呈现明亮荧光,同时将溶酶体染色降至最低。试剂盒还包含Hoechst 33342核染料、自噬诱导剂(雷帕霉素)和溶酶体抑制剂(氯喹)。
作用机制
该探针是一种阳离子两亲性示踪剂(CAT)染料,能以类似诱导磷脂沉积症药物的方式快速进入细胞。通过对染料上可滴定功能基团的精心选择,可防止其在溶酶体内积累,同时实现对自噬通路相关囊泡的标记。
自噬是一种应激诱导的保护机制,在基础条件下活性较低。当细胞遭遇营养耗竭、化学或环境应激等不利条件时,真核细胞通过溶酶体介导的细胞内容物批量降解来启动该机制。自噬活性增强在癌症、神经退行性疾病、心血管疾病和糖尿病病理中的作用已得到广泛认可和深入研究。当溶酶体功能被抑制、自噬囊泡无法被清除时,自噬流的诱导可通过自噬囊泡的增强积累来可视化。
产品详细信息
应用:流式细胞术、荧光显微镜、荧光检测、高通量筛选
应用说明:CYTO-ID自噬检测试剂盒通过荧光显微镜、流式细胞术和微孔板读数仪,提供快速、特异且定量的活细胞自噬监测方法。
试剂盒内容:CYTO-ID绿色检测试剂、Hoechst 33342核染料、自噬诱导剂(雷帕霉素)、氯喹对照、10X检测缓冲液
质量控制:每批CYTO-ID自噬检测试剂盒均按用户手册所述用于染色HeLa细胞。CYTO-ID自噬检测试剂掺入诱导细胞后,可观察到典型的球形囊泡在细胞质中积累。与未处理的HeLa细胞相比,处理样品在显微镜下荧光显著增强。
规格:-K200规格可用于200次流式检测、250次显微镜检测或3×96孔板检测;-0050规格可用于50次流式检测、60次显微镜检测或1×96孔板检测。
产品线:CYTO-ID自噬检测试剂盒是CELLESTIAL产品线成员,该产品线包含经广泛验证用于活细胞分析的荧光分子探针和检测试剂盒。
操作与储存
使用/稳定性:正确储存条件下,试剂盒组分自收到之日起稳定一年。
操作:避光保存,避免反复冻融。
短期储存:-20°C
长期储存:-80°C
运输:蓝冰
RUO——仅供研究使用
综上所述,CYTO-ID Autophagy detection kit凭借无需转染、快速定量、选择性标记自噬囊泡且低溶酶体背景等优势,为活细胞自噬研究提供了简便可靠的检测方案,适用于从基础研究到高通量药物筛选的广泛应用场景。
部分文献引用
Neuroglobin regulates autophagy through mTORC1/RAPTOR/ULK-1 pathway in human neuroblastoma cells: Manganelli, V., Costanzo, M., et al.; Sci. Rep. 15, 7642 (2025)
A sesquiterpene lactone, tomentosin, as a novel anticancer agent: orchestrating apoptosis, autophagy, and ER stress in colorectal cancer: S. ?etinkaya, et al.; Naunyn Schmiedebergs Arch Pharmacol , (2025)
Ancient genomic linkage of α-globin and Nprl3 couples metabolism with erythropoiesis: A.E. Preston, et al.; Nat Commun 16, 2749 (2025)

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