人白蛋白ELISA检测试剂盒，覆盖生理至病理浓度，减少稀释误差

一、产品概述

由艾美捷代理Bethyl Laboratories推出的人白蛋白（Human Albumin）ELISA检测试剂盒（货号：E88-129）为定量检测人白蛋白（Human Albumin）的双抗体夹心酶联免疫吸附测定（Sandwich ELISA）试剂盒。人白蛋白是由ALB基因编码的一种血清蛋白，Uniprot ID为P02768，在维持pH平衡、调节胶体渗透压以及运输脂肪酸、氨基酸、激素等多种化合物中发挥关键生理功能。本试剂盒适用于血清、血浆、脑脊液、乳汁及尿液等多种生物样本中白蛋白浓度的精确测定。

二、技术性能指标

参数 | 规格

检测靶标 | 人白蛋白

反应种属 | 人

检测范围 | 0.69 – 500 ng/ml

适用样本类型 | 血清、血浆、脑脊液、乳汁、尿液

检测方法 | 生物素-链霉亲和素-辣根过氧化物酶（Biotinylated-Streptavidin-HRP）

检测类型 | 双抗体夹心ELISA

三、储存与稳定性

储存条件：2 - 8 °C

有效期：自收货之日起6个月

原产地：美国

请按照指定温度保存所有试剂组分，避免反复冻融。首次使用后，未用完的板条应密封返回原包装，与其余试剂一同存放于2-8°C。

四、试剂盒组分

组分名称 | 规格 | 数量

人白蛋白预包被96孔可拆酶标板 | 1块 | 1

人白蛋白标准品（500 ng/管） | 500 ng/管 | 2

人白蛋白检测抗体 | 12 ml | 1瓶

20倍浓缩稀释缓冲液C | 25 ml | 1瓶

HRP溶液A | 12 ml | 1瓶

TMB底物液 | 12 ml | 1瓶

终止液 | 12 ml | 1瓶

20倍浓缩洗涤液 | 50 ml | 1瓶

封板膜 | - | 6张

五、检测原理

本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。酶标板已预先包被抗人白蛋白捕获抗体。加入样本或标准品后，样品中的人白蛋白与捕获抗体结合。洗板后加入检测抗体，形成“捕获抗体-白蛋白-检测抗体”复合物。检测抗体经生物素标记，随后与链霉亲和素标记的辣根过氧化物酶（HRP）结合。加入TMB底物后，HRP催化底物显色，颜色深度与样本中白蛋白含量呈正比。加入终止液终止反应后，在450 nm波长读取吸光度值，根据标准曲线计算样本中白蛋白浓度。

六、样本收集与处理

1. 血清：使用常规采血管收集全血，室温凝固30分钟后，1000×g离心15分钟，取上层血清。

2. 血浆：使用肝素、EDTA或柠檬酸钠抗凝管收集，1000×g离心15分钟，取上层血浆。

3. 脑脊液：常规腰椎穿刺收集，避免溶血，可直接检测或稀释后检测。

4. 乳汁：收集后10000×g离心10分钟去除脂肪层，取中层清液。

5. 尿液：收集晨尿或随机尿，1000×g离心10分钟去除沉淀。

注意：样本收集后应立即检测，或分装后于-80°C保存，避免反复冻融。检测前将样本恢复至室温，根据预实验结果使用1×稀释缓冲液进行适当稀释，确保读数落在标准曲线范围内。

七、检测步骤（简要）

1. 试剂准备：使用去离子水将20×洗涤液和20×稀释缓冲液C稀释为1×工作液。平衡所有试剂至室温。

2. 加样：每孔加入100 ?l标准品或稀释后的样本，覆盖封板膜，室温孵育2小时。

3. 洗板：弃去孔内液体，每孔加入300 ?l 1×洗涤液，洗涤4次，在吸水纸上拍干。

4. 加检测抗体：每孔加入100 ?l检测抗体，室温孵育1小时。

5. 洗板：重复步骤3。

6. 加HRP溶液：每孔加入100 ?l HRP溶液A，室温避光孵育30分钟。

7. 洗板：重复步骤3。

8. 显色：每孔加入100 ?l TMB底物液，室温避光孵育15-20分钟。

9. 终止：每孔加入100 ?l终止液，轻轻震荡混匀。

10. 读板：30分钟内于450 nm波长测定吸光度。

八、结果计算

以标准品浓度为横坐标，吸光度值为纵坐标，使用四参数逻辑斯蒂拟合（4-PL）或线性回归绘制标准曲线。根据样本的吸光度值从标准曲线上计算对应浓度，再乘以稀释倍数即得原始样本中白蛋白含量。

九、性能特征

检测范围：0.69 – 500 ng/ml，可覆盖生理及病理条件下的广泛浓度范围。

灵敏度：最低检测限为0.69 ng/ml。

特异性：抗体特异性识别人白蛋白，与小鼠、大鼠白蛋白无交叉反应。

重复性：批内和批间变异系数（CV）均<10%。

十、注意事项

1. 本产品仅限科研使用，不得用于临床诊断。

2. 不同批次试剂请勿混用。

3. TMB底物液应避光保存，若出现蓝色表明已污染，请勿使用。

4. 终止液含酸性物质，操作时请佩戴防护手套和护目镜。

5. 实验过程中需使用去离子水或蒸馏水。