猪IgG ELISA试剂盒，覆盖血清、血浆、初乳等，满足多种样本定量需求

一、产品概述

由艾美捷Bethyl Laboratories推出的本产品（货号：E101-104）是一款基于双抗夹心法开发的猪IgG酶联免疫吸附检测（ELISA）试剂盒，由美国制造，适用于猪血清、血浆、初乳及乳汁样本中IgG含量的定量检测。试剂盒采用生物素链霉亲和素辣根过氧化物酶（BiotinStreptavidinHRP）检测系统，检测范围为0.69  500 ng/ml，灵敏度高，特异性强，是猪免疫状态评估、初乳质量监控及疫苗研究等领域的重要工具。

二、技术规格

参数 | 详细信息

靶标 | 猪IgG

反应性 | 猪

应用 | ELISA

检测范围 | 0.69  500 ng/ml

样本类型 | 血清、血浆、初乳、乳汁

检测方法 | 生物素化链霉亲和素HRP

实验类型 | 双抗夹心ELISA

保存条件 | 28°C

有效期 | 收货后6个月

三、试剂盒组分

组分名称 | 规格 | 数量

猪IgG预包被96孔可拆板 | 1块 | 1

猪IgG标准品 | 1000 ng/瓶 | 2瓶

猪IgG检测抗体 | 12 ml | 1瓶

10×稀释缓冲液B | 25 ml | 1瓶

HRP溶液A | 12 ml | 1瓶

TMB底物液 | 12 ml | 1瓶

终止液 | 12 ml | 1瓶

20×洗涤缓冲液 | 50 ml | 1瓶

封板膜 | 6张 | —

四、产品背景

免疫球蛋白G（IgG）是猪血液/血浆中含量最高的免疫球蛋白，在体液免疫应答中发挥核心作用。其主要功能包括：

中和毒素：结合并中和细菌外毒素及病毒

激活补体：通过经典途径激活补体系统，介导病原体裂解

调理作用：标记病原体，促进吞噬细胞摄取和清除

抗体依赖细胞介导的细胞毒性：招募NK细胞等效应细胞杀伤靶细胞

在母猪初乳中，IgG含量极高（可达50 mg/ml以上），是新生仔猪被动免疫的主要来源。检测初乳及乳汁中IgG水平，可评估母源抗体传递效率；监测血清/血浆IgG浓度，则有助于判断猪群免疫状态及疫苗应答效果。

五、检测原理

本试剂盒采用双抗夹心ELISA法，具体流程如下：

1.包被：酶标板孔内已预包被抗猪IgG捕获抗体

2.加样：加入标准品或待测样本，样本中的猪IgG与捕获抗体结合

3.检测：加入生物素标记的抗猪IgG检测抗体，形成“捕获抗体猪IgG检测抗体”复合物

4.信号放大：加入HRP标记的链霉亲和素，与生物素高效结合

5.显色：加入TMB底物，HRP催化底物产生蓝色产物

6.终止：加入终止液，颜色变为黄色

7.读板：在450 nm波长处测定吸光度，信号强度与样本中IgG浓度呈正比

六、操作步骤

样本准备

血清/血浆：采集后避免溶血，可28°C短期保存（≤7天），长期保存需20°C冻存。使用前用1×稀释缓冲液B进行适当稀释（建议预实验确定最佳稀释倍数，典型稀释比为1:1000  1:10000）

初乳/乳汁：样本可能含有较高脂肪和蛋白，建议离心（10,000 × g，10分钟，4°C），取澄清中间层进行稀释检测。初乳样本需大倍数稀释（典型稀释比1:10000  1:100000）

试剂准备

洗涤缓冲液：将50 ml 20×洗涤缓冲液用去离子水稀释至1000 ml，混匀备用

1×稀释缓冲液B：将25 ml 10×稀释缓冲液B用去离子水稀释至250 ml，混匀备用

标准品：取1瓶标准品（1000 ng/瓶），加入1 ml 1×稀释缓冲液B，轻轻混匀，配制成1000 ng/ml的母液。然后进行7次2倍梯度稀释，获得500、250、125、62.5、31.25、15.625、7.8125、3.90625、1.953125、0.9765625、0.48828125 ng/ml等浓度。建议设置0 ng/ml空白对照（仅稀释缓冲液）

加样与孵育

1. 从密封袋中取出预包被板，设定标准品孔、空白孔和样本孔

2. 每孔加入100 μl标准品或稀释后的样本，空白孔加入100 μl 1×稀释缓冲液B

3. 用封板膜密封，室温（2025°C）孵育60分钟（或4°C过夜孵育）

4. 弃去孔内液体，每孔加入300 μl 1×洗涤缓冲液，洗涤35次，最后一次在吸水纸上拍干

检测抗体孵育

1. 每孔加入100 μl 猪IgG检测抗体（已含生物素，即用型）

2. 更换新封板膜，室温孵育60分钟

3. 重复洗涤步骤（35次）

HRP孵育

1. 每孔加入100 μl HRP溶液A（即用型）

2. 室温孵育30分钟

3. 重复洗涤步骤（5次，最后一次拍干）

显色与终止

1. 每孔加入100 μl TMB底物液

2. 室温避光孵育1520分钟（或至标准品最高浓度孔出现明显蓝色）

3. 每孔加入100 μl 终止液，轻轻震荡混匀，蓝色变为黄色

读板

使用酶标仪在450 nm波长处读取各孔吸光度（OD值）。建议在终止后30分钟内完成读数。