TopoGEN同源重组（HR）修复报告试剂盒（基于瞬时检测的试剂盒）方案

TopoGEN质粒转染分析的HR DNA修复报告试剂盒，旨在让研究人员研究他们选择的细胞系中的同源重组（HR）。该试剂盒使用GFP作为HR途径的体内读数，并包括在您自己的实验室中设置系统的适当控制。新：TopoGEN现在提供一种负担得起的试验规模（试剂盒中3个质粒各50ug），让您测试新的基于细胞的试剂盒的功效。

艾美捷TopoGEN拓扑异构酶II条带移位试剂盒：

产品型号：DR3050

类别：细胞环境DNA修复，移动瞬时检测DNA修复系统

标签：DNA修复，同源重组，HR DNA报告基因，质粒DNA

TopoGEN拓扑异构酶II条带移位试剂盒详情：

这是一个基于质粒转染的报告系统，旨在允许客户筛选或检查影响同源重组（HR）DNA修复过程的任何因子。它将在大多数可以转染的细胞系中工作。试剂盒使用GFP作为HR途径的体内读出。试剂盒包括两个被验证为高质量DNA的质粒（见图1和图2）：

? HR-GFP。当这个报告基因转染到细胞中时，不会表达GFP，因为基因在双盒结构中发生了突变。5'盒包含一个破坏性的I-Sce1位点/终止密码子，而3'盒在同一区域是野生型，但包含阻止表达的缺失。

? I-Sce1表达质粒。这是一种巨型内切核酸酶，除了位于HR-GFP的5'盒中的单个I-Sce1位点外，不会在人类基因组的任何地方切割。

当这两个质粒转染到同一细胞时，将有一个%GFP读数，反映HR修复的效率。由于试剂盒仅基于两个DNA，可以实现合理的转染效率，并且可以在几乎所有“可转染”的细胞系中检查HR修复过程。转染后，会产生一群GFP+细胞，可以进行分选或通过活细胞成像跟踪。HR修复的效率与转化为GFP+表型的细胞百分比相关。重要的是要在平行培养中包含带有eGFP的转染对照。eGFP对照基因可以单独购买，不在试剂盒中。

谁应该购买这个试剂盒？

对筛选针对整个HR DNA修复途径的因子、药物、基因或基因产物感兴趣的研发实验室会发现这个试剂盒非常有用。DNA修复途径充满了可药物化的目标，这一点已经得到了很好的证实。针对DNA修复的因子可能是很好的抗癌或抗病毒药物。此外，识别与DNA修复相互作用的其他基因和基因产物对于寻找新的药物靶点也很重要。这个试剂盒的一个主要优点是它在活细胞的环境中运行。这意味着结果将具有很高的生理相关性，因为事件在细胞内实时发生。此外，由于它基于荧光，可以利用单细胞成像跟踪经历修复的个体细胞，也可以使用时间推移成像跟踪这些细胞的后代。这个试剂盒仅基于质粒报告基因，允许研究人员将系统放置在他们选择的任何细胞系中。这在主要兴趣是细胞系或谱系模型时提供了极大的灵活性。无需创建带有整合报告基因的稳定细胞系（这需要时间），为研究者提供了快速进入药物测试或转录因子对HR的影响的途径。

HR修复报告基因试剂盒包含在任何动物细胞系中创建完整的同源重组报告系统所需的试剂。

I-Sce1基因表达质粒，pSCE1（储存于-20°C或4°C）。

DR-HRGFP（储存于-20°C或4°C）。这个质粒含有一个普鲁霉素选择基因。

eGFP（带有CMV启动子的野生型GFP）转染对照（储存于-20°C或4°C）。

对于所有质粒，DNA浓度通常为0.5微克/微升（但需在管标签上核实）。请注意，目录编号表示试剂盒大小，这是基于DNA的量。

可选：为了帮助建立系统，我们提供含有单个GFP修复报告基因的对照HeLa细胞系（稳定整合到基因组中），该细胞系在转染I-Sce1质粒后将进行DNA修复（形成GFP+细胞）（请咨询）。

试剂盒可能通过干冰或湿冰运输，或者在某些情况下可能在常温下运输。所有试剂在收到后应储存在4°C（短期）或-20°C（长期）。

艾美捷科技是TopoGEN的中国代理商，为科研工作者提供优质的产品与服务。