EZElisa雌二醇ELISA试剂盒参数分析&样品制备方案

雌二醇（E2）是一种属于雌激素类固醇激素，也是主要的女性性激素之一。它在调节女性生殖周期、发情和月经方面发挥着重要作用。雌二醇对于女性生殖组织（如乳房、子宫和阴道）的发育和维持至关重要，不仅在青春期、成年期和妊娠期间起作用，还对骨骼、脂肪、皮肤、肝脏和大脑等许多其他组织产生重要影响。尽管男性的雌激素水平较低，但雌激素在男性中也具有重要功能。此外，雌二醇存在于大多数脊椎动物、甲壳动物、昆虫、鱼类和其他动物物种中。

为了检测雌二醇含量，可以使用竞争性抑制酶免疫测定技术。该试剂盒提供了预包被特异性抗雌二醇抗体的微孔板。标准品或样品与与辣根过氧化物酶（HRP）偶联的雌二醇一起加入到微孔板的孔中。竞争性抑制反应发生在HRP标记的雌二醇与未标记的雌二醇与抗体之间。然后将底物溶液加入孔中，颜色的发展与样品中雌二醇的含量成反比。最后停止颜色的发展并测量颜色的强度。

以上是对雌二醇的描述以及用于检测雌二醇含量的竞争性抑制酶免疫测定技术的步骤。

艾美捷EZElisa雌二醇ELISA试剂盒基本参数：

目录号：D-AEK0003

规格：48T/96T

储存：在4°C下储存12个月，避光。

检测范围：40 pg/mL-1,000 pg/mL

灵敏度：40 pg/mL

精密度：内部试验精密度：变异系数（CV）＜15%。间接试验精密度：变异系数（CV）＜15%

恢复率：恢复率范围为85%至115%，总体平均恢复率为100%

特异性：EZElisa?雌二醇（E2）ELISA试剂盒对雌二醇的检测具有高灵敏度和优异的特异性。未观察到雌二醇与类似物之间的显著交叉反应或干扰。

适用样品：血清、血浆

供应材料和储存条件：

Note: Std1: 0 pg/mL; Std2: 40 pg/mL; Std3: 100 pg/mL; Std4: 200 pg/mL; Std5: 400 pg/mL; Std6；1,000 pg/mL.

EZElisa雌二醇ELISA试剂盒试剂准备：

注意：使用前将所有试剂平衡至室温。按照微孔板读数仪的说明进行设置，并在测量光密度之前预热15分钟。

1×洗涤缓冲液：将洗涤缓冲液（20×）用去离子水稀释1:20，得到1×洗涤缓冲液。储存在4°C。如果洗涤缓冲液浓缩物中形成了结晶，请轻轻加热至完全溶解。储存在室温下。请注意，1×洗涤缓冲液稳定期为30天。

工作溶液：根据辣根过氧化物酶偶联的雌二醇的体积取相应的检测缓冲液1/10，并与辣根过氧化物酶偶联的雌二醇混合，得到工作溶液，使用前进行混合。例如：取3 mL辣根过氧化物酶偶联的雌二醇，加入0.3 mL检测缓冲液，混合得到工作溶液。

EZElisa雌二醇ELISA试剂盒样品制备：

1.血清：使用血清分离管，在室温下凝固样品30分钟后，以1,000 g的速度离心15分钟。立即使用血清进行检测，或将样品分装并储存在-20°C。避免反复冻融循环。

2.血浆：使用EDTA、肝素或柠檬酸盐作为抗凝剂收集血浆。在采集后30分钟内以1,000 g的速度离心15分钟。立即进行检测，或将样品分装并储存在-20°C。避免反复冻融循环。

注意：不要使用明显溶血或脂肪乳化的样本。如果样品将在24小时内使用，可以储存在2到8°C。避免反复冻融循环。在进行检测前，应将冷冻样品缓慢恢复至室温，并轻轻混匀。

程序分析：

1. 从微孔板架上取下多余的微孔板条，将它们放回包含干燥剂包的铝箔袋中，并重新密封。

2. 每个孔中加入50 μL标准品或样品。建议将所有标准品和样品都复制加入微孔板中。设置一个空白孔，不加入任何溶液。

3. 向每个孔中加入50 μL工作溶液（空白孔除外），充分混匀，用提供的孔盖盖好，然后在37°C下孵育1小时。

4. 倒掉每个孔中的液体并进行洗涤，总共洗涤三次。使用多通道移液器或自动微孔板洗涤器，将每个孔填满1×洗涤缓冲液（250 μL），静置10秒钟，每个步骤中完全去除液体对良好的性能至关重要。在最后一次洗涤后，倒转孔板并用干净的纸巾轻轻拍干任何剩余的1×洗涤缓冲液。

5. 向每个孔中加入50 μL HRP底物A和50 μL HRP底物B，充分混匀，并用提供的孔盖盖好。在37°C下孵育15分钟。将孔板放在黑暗中，远离气流和其他温度波动。

6. 向每个孔中加入50 μL停止溶液。停止溶液应按照HRP底物的加入顺序加入到孔板中。孔中的颜色应从蓝色变为黄色。如果孔中的颜色是绿色，或者颜色变化不均匀，请轻轻敲击孔板以确保充分混合。

7. 在30分钟内使用设置为450 nm的微孔板读数仪测定每个孔的光密度。

该试剂仅用于科学研究领域，不适用于临床诊断或其他用途。

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