使用苯乙烯/丙烯酸共聚物稳定膜蛋白的方法首次由Smith及其同事描述(1)。这些共聚物可以在没有去污剂的情况下,通过包裹在脂质双分子层上形成类似盘状粒子或纳米盘的方式,将膜蛋白与天然膜融合在一起。基于HEPES的AASTY产品含有共聚物和50 mM HEPES缓冲液,调整至pH值7.5,因此只需添加双蒸馏水即可直接使用。选择了非常有效的pH值用于蛋白质的溶解。Cube Biotech的AASTY 6-45是一种高纯度的苯乙烯和丙烯酸共聚物,分子量(Mw)为5,500。共聚物在溶解后的浓度为1.5至6.0%,当加入到膜蛋白中时,会导致高浓度。共聚物在与脂质接触的表面具有疏水性,外部表面具有亲水性。这种结构使纳米盘在水溶液中高度溶解,并允许在没有去污剂的情况下溶解膜蛋白。该产品可与磷脂一起使用,如二十二碳二酸二亚麻酰甘油磷胆碱(DMPC)或棕榈酰油酰基磷脂酰胆碱(POPC),并与胆酸钠结合。AASTY和膜蛋白的复合物可与许多生物物理学分析方法一起使用,如SDS-PAGE、SEC、Western Blot、UV/Vis光谱和许多色谱过程。再构建共聚物溶液Cube AASTY共聚物以含有50 mM HEPES、pH值7.5的溶液形式冻干交付。每个小分子含有50毫克或1克聚合物。每50毫克聚合物需添加0.5毫升双蒸馏水,即可恢复原始溶液,共聚物浓度为10%。根据不同应用方案的要求,此储备液可以进一步稀释。
作为Cube Biotech在中国的区域总代理,艾美捷科技强烈推荐AASTY 6-50,10x1g。产品仅用于科研,不可用于临床诊断。
产品名称 | 货号 | 详情 |
AASTY 6-50,10x1g | CBB-18262 | 查看 |
技术细节
产品名称:苯乙烯丙烯酸共聚物,钠盐,50 mM HEPES,pH值7.5
吸光度(280 nm,1% 溶液):大于0.1
AA/STY比例:50:50
溶解度:大于10%(H2O)
颜色:白色至浅黄色
气味:无味
pH值(溶解后):7.5 ± 0.3
分子量:5,500 g/mol
运输和储存
运输温度:常温
冻干共聚物的储存:-20°C,可保存数年
溶解共聚物的储存:2-8°C,可保存数天
对于从稀溶液中纯化带有His标签的蛋白质,我们推荐使用PureCube Ni-NTAMagBeads。对于GST标记的、Rho1d4标记的或Strep?标记的蛋白质的亲和纯化,Cube Biotech提供专用琼脂糖树脂、磁珠和预包装柱。
文献参考:
1. Anton A.A. Smith, Henriette E. Autzen, Bryan Faust, Joseph L. Mann, Benjamin W. Muir, Shaun Howard, AlmarPostma, Andrew J. Spakowitz, Yifan Cheng, and Eric A. Appel; Lipid Nanodiscs via Ordered Copolymers Chem 6,2782–2795, October 8, 2020.
2. M Timcenko, AAA Autzen, HE Autzen Characterization of divalent cation interactions with AASTY nativenanodiscs. Biorxiv, doi: https://doi.org/10.1101/2021.10.07.463511
Cube Biotech 是一家专注于蛋白纯化产品的德国生产商,尤其擅长蛋白纯化及膜蛋白纯化。Cube Biotech 研发团队拥有近50年经验在膜蛋白的表达、纯化和结晶等研究,为制药和生物技术行业以及学术环境提供这些经验。膜蛋白的结构分析仍是一个巨大的挑战,尤其是关于人源膜蛋白。德国 Cube Biotech 为研究和进步释放膜蛋白的力量,以团队所有科学专业知识支持制药和生物技术界。通过运用前沿科学技术,德国 Cube Biotech 提供的系列产品解决膜蛋白质纯化和稳定化研究。Cube Biotech可提供一系列用于蛋白质亲和层析填料和蛋白质稳定化的高品质产品,产品的配套试剂包括去污剂、无细胞表达裂解物、纳米盘支架蛋白和膜蛋白结晶板。
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