使用苯乙烯/马来酸共聚物来稳定膜蛋白的方法最初由Knowles及其同事描述(1)。这些共聚物可以在没有清洁剂的情况下,通过包裹在脂质双层上形成类似盘状粒子或纳米盘的方式,从天然膜中提取膜蛋白并稳定在双层中。基于HEPES的SMALP产品包含共聚物和50 mM HEPES缓冲液,调节至pH 7.5,因此只需添加双蒸馏水即可直接应用。所选的pH值非常适合蛋白质的溶解。Cube Biotech的SMALP 200是苯乙烯和马来酸高度纯化的共聚物(SMA),分子量(Mw)为6,500。在溶解后,共聚物的浓度为1.5%至6.0%,当添加到膜蛋白时会导致高浓度。共聚物提供了一个面向脂质的疏水表面,以及一个外部的亲水表面。这种设置使纳米盘在水溶液中高度溶解,并允许在没有清洁剂的情况下溶解膜蛋白。该产品可与磷脂一起使用,例如二十四碳二酰基甘油磷酰胆碱(DMPC)或棕榈酰亚油酰磷脂酰胆碱(POPC),结合十二烷基硫酸钠。SMA和膜蛋白的复合物可用于许多生物物理分析,如SDS-PAGE、SEC、Western Blot、UV/Vis光谱和许多色谱程序。Cube SMA共聚物溶液的重组Cube SMA共聚物经过冻干处理,原液中含有50 mM HEPES,pH 7.5。每个小分子含有50毫克蛋白质。加入0.5毫升双蒸馏水将恢复含有10%共聚物浓度的原始溶液。根据不同的应用协议,这种储备液可以进一步稀释。
作为Cube Biotech在中国的区域总代理,艾美捷科技强烈推荐SMALP 200 10 g。产品仅用于科研,不可用于临床诊断。
产品名称 | 货号 | 详情 |
SMALP 200 10 g | CBB-18212 | 查看 |
技术细节
名称:苯乙烯马来酸共聚物钠盐 / SMA / SMALP 200,50 mM HEPES,pH 7.5
吸光度(280 nm,1% 溶液):> 0.3
分子量:6,500 克/摩尔
S:MA 比例:2.3:1
溶解度:> 10%(H2O)
颜色:微黄
气味:无味
pH(溶解后):7.5 ± 0.1
运输和存储
运输温度:常温
冻干共聚物存储:-20°C,可保存数年
溶解共聚物存储:2-8°C,可保存数天
文献参考:
1. Knowles, T. J., Finka, R., Smith, C., Lin, Y.-P., Dafforn, T., & Overduin, M. (2009). Membrane Proteins Solubilized Intact in LipidContaining Nanoparticles Bounded by Styrene Maleic Acid Copolymer. Journal of the American Chemical Society, 131(22),7484–7485. doi:10.1021/ja810046q .
2. Lee, S. C., Knowles, T. J., Postis, V. L. G., Jamshad, M., Parslow, R. A., Lin, Y., … Dafforn, T. R. (2016). A method for detergent-freeisolation of membrane proteins in their local lipid environment. Nature Protocols, 11(7), 1149–1162. doi:10.1038/nprot.2016.070
Cube Biotech 是一家专注于蛋白纯化产品的德国生产商,尤其擅长蛋白纯化及膜蛋白纯化。Cube Biotech 研发团队拥有近50年经验在膜蛋白的表达、纯化和结晶等研究,为制药和生物技术行业以及学术环境提供这些经验。膜蛋白的结构分析仍是一个巨大的挑战,尤其是关于人源膜蛋白。德国 Cube Biotech 为研究和进步释放膜蛋白的力量,以团队所有科学专业知识支持制药和生物技术界。通过运用前沿科学技术,德国 Cube Biotech 提供的系列产品解决膜蛋白质纯化和稳定化研究。Cube Biotech可提供一系列用于蛋白质亲和层析填料和蛋白质稳定化的高品质产品,产品的配套试剂包括去污剂、无细胞表达裂解物、纳米盘支架蛋白和膜蛋白结晶板。
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