重组蛋白在生命科学研究和医药领域具有广泛的应用。为了提高蛋白的纯度、一致性和生物活性,无动物源和无载体的生产方法逐渐成为研究关注的焦点。重组小鼠G-CSF(粒细胞集落刺激因子)是一种重要的细胞因子,对造血系统的发育和功能具有重要作用。本文将介绍无动物源和无载体的重组小鼠G-CSF蛋白的表达、纯化方法以及其在生物学研究和临床应用中的潜力。
一、无动物源的重组小鼠G-CSF蛋白的表达和纯化方法:
无动物源的重组小鼠G-CSF蛋白是通过基因工程技术在无动物细胞系统中表达和生产的。常用的无动物源细胞系统包括大肠杆菌、酵母菌和哺乳动物细胞系等。在表达过程中,选择适当的表达载体和宿主细胞,并通过优化培养条件和表达策略,实现高效的蛋白表达。随后,采用亲和层析、离子交换层析、凝胶过滤层析等纯化技术,去除杂质并获得高纯度的重组小鼠G-CSF蛋白。
二、无载体蛋白的纯化方法在重组小鼠G-CSF蛋白制备中的应用:
无载体蛋白的纯化方法是指在表达和纯化过程中没有使用外源载体蛋白。这种方法避免了外源载体蛋白对目标蛋白的污染和可能引起的免疫反应。在重组小鼠G-CSF蛋白制备中,可以采用标签蛋白自身的亲和纯化、逆向相层析和逆流电泳等技术,以实现无载体蛋白的高效纯化。
三、重组小鼠G-CSF蛋白的特性和生物活性评估:
经过无动物源和无载体的表达和纯化,重组小鼠G-CSF蛋白具有更高的纯度和一致性。通过生物学活性评估,研究人员发现无动物源和无载体的重组小鼠G-CSF蛋白能够促进粒细胞的增殖和分化,并参与免疫调节和炎症反应等生理过程。此外,重组小鼠G-CSF蛋白还被广泛应用于造血干细胞移植、白血病治疗和免疫缺陷病治疗等临床领域。
四、无动物源和无载体的重组小鼠G-CSF蛋白的应用前景:
无动物源和无载体的重组小鼠G-CSF蛋白在生物学研究和临床应用中具有广阔的前景。在生物学研究方面,它可以用于造血系统的发育和功能研究、干细胞扩增和分化的调控以及新药靶点的发现。在临床应用方面,重组小鼠G-CSF蛋白已被广泛应用于粒细胞缺乏症、白血病治疗和造血干细胞移植等领域。
艾美捷重组小鼠G-CSF/粒细胞集落刺激因子,无动物源&无载体蛋白基本参数:
目录号:C-CYP245
规格:5μg, 20μg, 100μg, 500μg, 1mg
运输:蓝冰
来源:大肠杆菌。
纯度:通过SDS-PAGE测定>98%。镍NTA色谱法。
生物活性:通过其在NFS-60细胞中诱导增殖的能力来测量。这种作用的ED50<50pg/mL。重组小鼠G-CSF的比活性>2×107IU/mg
内毒素:通过LAL法,每1μg蛋白质<0.1EU。
氨基酸序列:VPLVTVSALPPSLPLPRSFLLKSLEQVRKIQASGSVLLEQLCATYKLCHPEELVLLGHSLGIPKASLSGCSSQALQQTQCLSQLHSGLCLYQGLLQALSGISPALAPTLDLLQLDVANFATTIWQQMENLGVAPTVQPTQSAMPAFTSAFQRRAGGVLAISYLQGFLETARLALHHLA,N-末端有多组氨酸标签。
配方:从无菌过滤的1×PBS水溶液中冻干,pH 7.4。
无动物源和无载体的重组小鼠G-CSF蛋白的表达和纯化方法为蛋白质研究提供了新的选择。通过优化表达和纯化策略,可以获得高纯度、高活性的重组小鼠G-CSF蛋白。这种蛋白的应用前景广阔,有望为生物学研究和临床治疗带来新的突破。然而,仍需要进一步的研究来深入了解其生物学功能和潜在的临床应用机制。
参考文献:
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Souza LM, et al. (1986). Recombinant human granulocyte colony-stimulating factor: effects on normal and leukemic myeloid cells. Science. 232(4746): 61-65.
Welte K, et al. (1985). Purification and biochemical characterization of human pluripotent hematopoietic colony-stimulating factor. Proc Natl Acad Sci U S A. 82(5): 1526-1530.
该试剂仅用于科学研究领域,不适用于临床诊断或其他用途。
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