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C-BSM583快速内切酶XhoI解决方案

发布者:艾美捷科技    发布时间:2023-09-08     
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快速内切酶,可在5~15 min内完成反应,最适反应温度为37℃,受CpG甲基化影响,序列完全重叠,剪切受阻,失活条件为80℃温育20 min,3 h温育未表现星号活性,延时酶切可能出现星号活性。

 

艾美捷快速内切酶XhoI

Cat #: C-BSM583

Size: 500 rxns

Storage: -20°C

 

快速内切酶XhoI组成:

Components Amount

FlyCut?"  Xhol 500μl

10x CutOne' Buffer 3x1 ml

10x CutOne' Color Buffer 3×1 ml

 

使用方法:

1.快速DNA消化方案

①将以下反应组分按所示顺序在冰上混合:

快速内切酶XhoI


对于纯化的PCR产物。如果PCR产物未纯化,则10×CutOne的量? 缓冲液应减少到2μl,以减少未纯化的PCR产物中剩余的金属离子。我们建议在消化用于克隆之前纯化PCR产物,因为一些DNA聚合酶的核酸外切酶活性可能会改变切割DNA的末端。

②轻轻搅拌并向下旋转;

③在37°C下培养15分钟(质粒DNA)或15~30分钟(PCR产物)或30~60分钟(基因组DNA);

④ 可选:在80°C下加热20分钟使酶失活;

⑤如果CutOne? 在反应中使用颜色缓冲液,将反应混合物的等分试样直接装入凝胶中。

2.DNA的双重和多重消化

① 使用每种酶1μl,并适当扩大反应条件;

② 反应混合物中酶的总体积不应超过总反应体积的1/10;

③如果酶需要不同的反应温度,从需要较低温度的酶开始,然后加入第二种酶并在较高温度下孵育。

3.扩大质粒DNA消化反应


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