BioXCell ReadyTag抗GFP：提升GFP标记蛋白研究的精确度与效率

F56-6A1.2.3单克隆抗体与增强型绿色荧光蛋白（GFP）反应。GFP是一种27kDa的蛋白质，当暴露在蓝色至紫外线范围内的光下时，会发出亮绿色荧光。在细胞和分子生物学中，GFP已成为一种宝贵的工具。GFP通常用于可视化特定的细胞群，并作为基因表达和定位的报告者。YFP与GFP的不同之处在于T203Y处的突变；针对全长GFP产生的抗体也应检测YFP和其他变体。

作为BioXCell在中国的区域总代理，艾美捷科技强烈推荐BioXCell热销产品ReadyTag抗GFP。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

ReadyTag抗GFP：

同型 小鼠IgG2b

推荐稀释液 使用InVivoPure pH 7.0稀释液

偶联 本产品未进行偶联。可通过我们的抗体偶联服务进行偶联。

免疫原 全长增强型绿色荧光蛋白（enhanced GFP）

报告应用 西方印迹法

免疫荧光

配方 磷酸盐缓冲液，pH 7.0

不含稳定剂或防腐剂

内毒素 <2EU/mg（<0.002EU/μg）

通过LAL凝胶凝集试验测定

纯度 >95%

通过SDS-PAGE测定

无菌性 0.2微米过滤

生产 在无动物设施中从细胞培养上清液中纯化

纯化 使用蛋白G

RRID AB_2687789

分子量 150千道尔顿

储存 抗体溶液应以原始浓度在4°C下储存。请勿冷冻。

文献参考：

Immunofluorescence

Earley, L. F., et al. (2015). "Identification and characterization of nuclear and nucleolar localization signals in the adeno-associated virus serotype 2 assembly-activating protein" J Virol 89(6): 3038-3048.

腺相关病毒血清型2（AAV2）的组装激活蛋白（AAP）是一种核仁定位蛋白，在将病毒衣壳VP3蛋白运输到核仁进行组装中起着关键作用。在这里，我们鉴定和表征了AAP2羧基末端区域（氨基酸位置144至184）附近的AAV2-AAP（AAP2）核（NLS）和核仁（NoLS）定位信号（AAP2（144-184））。该区域从氨基末端到羧基末端包含五个富含基本氨基酸（BR）的簇，KSKRSRR（AAP2BR1）、RRR（AAP2B R2）、RFR（AAP2 BR3）、RSTSSR（AAP2B R4）和RRIK（AAP2B R5）。我们分别通过精氨酸/赖氨酸到丙氨酸的突变或删除AAP2BR和8个和1个绿色荧光蛋白（GFP）-AAP2BR和β-半乳糖苷酶-APA2BR融合蛋白创建了30个AAP2BR突变体，并通过免疫荧光显微镜分析了它们在HeLa细胞中的细胞内定位。结果表明，AAP2（144-184）具有冗余的多部分NLS，4个AAP2BR的任何组合，但不是3个或更少，都可以构成功能性的NLS-NoLS；AAP2BR1和AAP2BR2在核定位中起着最有影响力的作用，但如果所有4个其他AAP2BR都存在，则这两个AAP2BR中的任何一个都是不必要的，从而产生3个不同的重叠NLS基序；并且NoLS以依赖于上下文的方式在五个AAP2BR和功能之间冗余地共享。AAP2BR突变不仅导致细胞内定位异常，还不同程度地减弱了AAP2蛋白的表达，这两种异常都对衣壳的产生产生了显著的负面影响。因此，本研究揭示了AAP2中混合NLS和NoLS的组织，并深入了解了它们在衣壳组装中的功能作用。重要：腺相关病毒（AAV）已成为体内基因治疗的流行和成功的载体；然而，它的生物学尚未被完全理解。在这方面，最近发现的组装激活蛋白（AAP）是一种非结构、核仁定位的AAV蛋白，对病毒衣壳组装至关重要，这为我们更好地了解病毒颗粒形成所需的基本过程提供了新的机会。在这里，我们鉴定了来自AAV血清型2（AAV2）的AAP羧基末端的碱性氨基酸簇，它们充当核和核仁定位信号。我们还证明了它们在维持AAP表达水平和有效生产病毒衣壳方面的重要性。深入了解AAP的功能可以阐明AAV衣壳组装的要求和过程，这可能会改善用于基因治疗的载体生产。这项研究也为越来越多的核和核仁定位信号研究做出了贡献。

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