BioXCell RecombiMAb人IgG 4(S228 P/R409 K)同种型对照，抗鸡蛋溶菌酶，高品质免疫学试剂

这种人IgG4 S228P/R409K同种型对照抗体与鸡蛋溶菌酶反应，对任何人类样本的特异性结合率低或没有。包括S228P突变以防止IgG4 Fab交换。添加R409K突变已被证明可以防止酸诱导的人IgG4聚集。这种重组人IgG4抗体在CHO细胞中产生。

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RecombiMAb人IgG 4(S228 P/R409 K)同种型对照，抗鸡蛋溶菌酶：

亚型 人类IgG4, κ

推荐稀释缓冲液 InVivoPure pH 7.0稀释缓冲液

突变 S228P/R409K

免疫原 鸡蛋溶菌酶（HEL）

配方 PBS，pH 7.0

不含稳定剂或防腐剂

内毒素 <1EU/mg (<0.001EU/μg)

由LAL凝胶凝集试验确定

纯度 >95%

由SDS-PAGE测定

无菌性 0.2微米过滤

生产 从无动物设施中的CHO细胞上清液中纯化

纯化 蛋白A

分子量 150 kDa

鼠源病原体检测 鼠痘病毒/鼠痘：阴性

汉坦病毒：阴性

K病毒：阴性

乳酸脱氢酶升高病毒：阴性

淋巴细胞性脑膜炎病毒：阴性

小鼠腺病毒：阴性

小鼠巨细胞病毒：阴性

小鼠肝炎病毒：阴性

小鼠微小病毒：阴性

小鼠诺如病毒：阴性

小鼠细小病毒：阴性

小鼠轮状病毒：阴性

支原体肺菌：阴性

小鼠肺炎病毒：阴性

多瘤病毒：阴性

呼吸道病毒筛查：阴性

仙台病毒：阴性

鼠类脑脊髓炎：阴性

储存 抗体溶液应储存在4°C的原始浓度下。请勿冷冻。

文献参考：

Namisaki H, Saito S, Hiraishi K, Haba T, Tanaka Y, Yoshida H, Iida S, Takahashi N. (2020). "R409K mutation prevents acid-induced aggregation of human IgG4" PLoS One 15(3):e0229027. 

人免疫球蛋白G同种型4（IgG4）抗体适合以拮抗剂或激动剂形式使用，因为它们的低效应功能可以防止靶细胞毒性或不需要的细胞因子分泌。然而，在制造治疗性抗体时，它们在纯化过程中暴露于低pH值，IgG4比IgG1更容易受到低pH值诱导的聚集。因此，我们研究了低pH下IgG4聚集的潜在机制，并设计了一种稳定性增强的IgG4。通过交换IgG1和IgG4的恒定区，我们确定恒定重链（CH3）结构域对聚集形成至关重要，但IgG4中的核心铰链稳定S228P突变不足以防止聚集。为了鉴定易聚集的氨基酸，我们将IgG4的CH3结构域替换为IgG1的CH3结构区，将IgG4 Arg409改为Lys，从而像IgG1一样有效地防止IgG4变体的聚集。其他可变区变体也有稳定作用。使用差示扫描量热法对热稳定性进行分析表明，R409K取代增加了CH3的Tm值，表明R409K突变有助于CH3-CH3相互作用的结构增强。R409K突变不影响与抗原/人Fcγ受体的结合；然而，在小鼠模型的体外和体内，IgG4中同时存在的S228P和R409K突变显著抑制了Fab臂交换，其效果与IgG1中的一样有效。我们的研究结果表明，IgG4 R409K变体代表了一种潜在的治疗性IgG，可用于低效应活性形式，表现出更高的稳定性。

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