Biosensis β淀粉样蛋白肽(A-β40/42),小鼠单克隆抗体多应用解决方案

β-淀粉样蛋白肽来源于淀粉样前体蛋白（APP）的切割，长度从39到43个氨基酸不等。然而，与阿尔茨海默病（AD）病理特征相关的淀粉样β肽（Aβ）形式仍不清楚。特别是，细胞内Aβ积累的神经毒性是一个研究和争议的重要领域，主要是因为被认为特异性识别Aβ的抗体实际上被发现可以检测细胞内APP，而不仅仅是Aβ。

β-淀粉样蛋白肽（A-beta 40/42），小鼠单克隆抗体（未结合），适用于WB、IHC-Frozen、IHC-Paraffin-embedded、ICC、IP、FC、ELISA。

该抗体已在WB中使用纯化的合成β-淀粉样蛋白制剂和转基因小鼠脑甲酸提取物进行了测试（见图1）。从提取物中进行WB检测需要甲酸提取/浓缩。MOAB-2抗体特异性识别β-淀粉样蛋白，不识别APP。建议WB稀释比例为1:2000-1:5000，使用标准ECL检测系统。

为了获得最佳结果，检测β-淀粉样蛋白的组织样本应按照K.L. Youmans等人在《Journal of Neuroscience Methods》196（2011）51-59中详细说明的方法准备。在直接WB中检测β-淀粉样蛋白40/42可能很困难；建议按照Youmans KL等人2012年的详细说明使用点印迹法检测准备好的样本。

尚未测试红外或荧光检测系统，但由于检测方法的灵敏度增加，预计它们在较高一抗稀释比例下能很好地工作。

IHC建议稀释比例为1:50-1:1000。新鲜冷冻、4%多聚甲醛固定冷冻或甲醛固定石蜡包埋组织均适用。最佳稀释比例必须由最终用户确定。固定组织需要抗原修复以获得最佳染色效果。

抗体已在3xTg和5xFAD小鼠的4%多聚甲醛/0.1%戊二醛固定冷冻组织上进行了测试。MOAB-2抗体在IHC中检测到细胞内和细胞外的β-淀粉样蛋白，但不检测APP（Youmans KL等人2012年）。

该抗体还与经过热诱导表位修复（HIER）的存档甲醛固定、石蜡包埋组织样本反应：推荐的柠檬酸盐，pH 6.0缓冲液用于HIER。没有抗原修复时信号较弱。免疫反应性在阿尔茨海默氏脑内神经内淀粉样沉积（斑块）中表达。MoAB-2被发现非常干净，具有极好的信噪比，没有神经细胞弥散染色。

此外，MOAB-2在使用石蜡固定、自由浮动切片的A-beta检测中显示出无显著差异（Youmans KL等人2012年）。与没有FA相比，甲酸（FA）处理导致细胞内和细胞外A-beta的最佳检测（在88% FA中孵育8分钟，Youmans KL等人2012年）。自由浮动组织切片在含有0.25% Triton X-100的TBS中通透化（TBSX；3次10分钟），用3%马血清在TBSX中封闭（3次10分钟），然后用1%马血清在TBSX中（2次10分钟），并在含有1%马血清的TBSX中与适当的一抗孵育过夜。有关完整的IH(P)协议和方法详情，请参阅Youmans KL等人2012年的研究。

对于IF，建议稀释比例为1:100-1:500。抗体已在4% PFA固定冷冻组织上进行了测试。固定组织在TBS中洗涤（3次10分钟），然后在88% FA中孵育（8分钟），然后在TBSX中通透化（3次10分钟），并在含有5%牛血清白蛋白（BSA；1小时）的TBSX中封闭。切片随后在含有2% BSA的TBSX中与适当的一抗孵育过夜。检测通过荧光标记的二抗进行（Youmans KL等人2012年）。

对于IP，建议稀释比例为1:200至1:1000，使用蛋白A/G结合的珠子作为捕获载体（Youmans KL等人2012年）。

在ELISA中，建议稀释比例为1:50-1:1000。该抗体已在合成β-淀粉样蛋白和β-淀粉样蛋白-Tg小鼠组织匀浆的ELISA中进行了测试。Biosensis建议所有应用的最佳稀释/浓度应由最终用户确定。提供的稀释比例仅作为基本指南。

作为Biosensis在中国的区域总代理，艾美捷科技强烈推荐Biosensis热销产品β淀粉样蛋白肽(A-β40/42),小鼠单克隆抗体-100ug。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

β淀粉样蛋白肽(A-β40/42),小鼠单克隆抗体-100ug：

应用：ELISA、FC、ICC、IHC-Frozen、IHC-Paraffin-embedded、IP、WB

应用详情：Western Blotting（WB）、免疫组织化学（IHC）、免疫组织化学/石蜡包埋IH(P)、免疫沉淀（IP）、免疫荧光（IF）、ELISA。

目标：β-淀粉样蛋白肽（A-beta 40/42）

特异性：MOAB-2通过点印迹法检测富含U-、O-、F-Aβ42和U-Aβ40的制剂，因此是一种泛特异性Aβ抗体。然而，MOAB-2对更具神经毒性的Aβ42比Aβ40更具选择性。实际上，MOAB-2展示了对抗原浓度的滴定，并在2.5 pmol检测Aβ40，但在抗原浓度低至约0.1 pmol时检测U-、O-和FAβb42（Youmans. KL等人2012年）。MOAB-2不检测APP（淀粉样前体蛋白）。人类，大鼠，其他物种尚未测试。通过点印迹法，MOAB-2检测到大鼠Aβ40和人类Aβ40，尽管对Aβ42的亲和力较低（Youmans. KL等人2012年）。

目标宿主物种：人类

物种反应性：人类、大鼠

抗体宿主：小鼠

抗体类型：单克隆

抗体亚型：IgG2b，lambda

克隆名称：MOAB-2

结合物：未结合

免疫原描述：重组人β-淀粉样蛋白42（Aβ42）：DAEFRHDSGYEVHHQKLVFFAEDVGSNKGAIIGLMVGGVVIA

纯度描述：本产品是蛋白A纯化的小鼠IgG2b，含有0.02 M磷酸钾、0.15 M氯化钠、0.01%叠氮化钠，pH 7.2。

格式：冻干，来自蛋白A纯化制剂，含有0.02 M磷酸钾、0.15 M氯化钠、0.01%叠氮化钠、0.1%海藻糖，pH 7.2；含有0.01%叠氮化钠作为防腐剂。

复溶说明：打开前短暂旋转小瓶。用100 ?L无菌过滤的超纯水复溶。离心去除任何不溶物质。最终缓冲液为0.02 M磷酸钾、0.15 M氯化钠、0.01%叠氮化钠、0.1%海藻糖，pH 7.2。

储存说明：复溶后，将分装在-20 °至-70°C保存以获得更高的稳定性。在2-8°C下可保存一周，保温，避光；使用无菌方法和移液器。可添加高纯度甘油（1:1）以增加稳定性。避免重复冻融循环。不使用时请紧闭并避光保存。

批号：请参见物品标签。

有效期：自收到之日起12个月（未开封小瓶）。

替代名称：Beta-APP42；Beta-APP40；β-淀粉样蛋白42；β-淀粉样蛋白40；ABPP；APPI；淀粉样βA4蛋白；MOAB2；MOAB-2；阿尔茨海默氏抗体；AB40；AB42；abeta

产品图片：

从12个月大的5xFAD小鼠身上采集皮质和海马的组合样本。使用Youmans，Molecular Neurodegeneration，2012中所述的标准蛋白质印迹程序分析1.25-25mg FA提取物。MOAB-2的浓度为1?g/mL。

提取方案：如Youmans等人，J Neurosci Methods，2011所述，修改了3步顺序提取。修改涉及在步骤3中使用较少体积的甲酸（FA），以获得更浓缩的提取。因此，添加70%的FA至600mg/mL的浓度，而不是Youmans等人所述的150mg/mL。中和甲酸提取物的最终蛋白质浓度为0.9mg/mL

文献参考：

Liang C et al. (2025) “Mannose Promotes BB-Amyloid Pathology by Regulating BACE1 Glycosylation in Alzheimer’s Disease” Adv Sci (Weigh) 2025 Jan 14:e2409105. doi:10.1016/j.neuropharm.2025.110300 Online ahead of print . Application: IHC. Species: Mice

Malik N et al. (2024) Regional AT 8 reactive tau species correlate with intracellular AB levels in cased of low AD neuropathology change  Acta Neuropathology. 147(1):40 Application: Human IHC

Nu?ez?Diaz C et al. (2024) The fuorescent ligand bTVBT2 reveals increased p?tau uptake by retinal microglia in Alzheimer’s disease patients and AppNL?F/NL?F mice Alzheimers Res Ther. 16:4 Application: IHC.

Biosensis专注于神经科学领域的抗体和试剂的开发，特别是神经营养因子和神经营养因子受体。除神经营养因子，我们的神经科学产品组合还被广泛用于神经退行性疾病、神经发育和神经代谢的研究。重点研究领域包括阿尔茨海默氏症（AD）、帕金森氏症（PD）和肌萎缩侧索硬化（ALS）疾病，以及自噬和代谢应激障碍，包括肥胖、代谢综合征的研究、神经免疫学和炎症。

作为Biosensis在中国区域的代理，艾美捷科技有限公司将为中国客户提供全面的Biosensis产品。