Biosensis人类成熟NGF/前体NGF联合快速酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒结合了两种互补的ELISA试剂盒,用于检测两种最重要的NGF亚型:成熟NGF(BEK-2212)和全长前体NGF(BEK-2226)。
这两种试剂盒均为夹心法ELISA,适用于在细胞培养上清液、血清和柠檬酸盐血浆中定量检测成熟NGF和前体NGF。如果按照说明书操作,仅需不到4小时即可完成检测,且简化了实验流程,同时不损失灵敏度或特异性。研究人员已使用这两种试剂盒检测人尿液中的NGF/前体NGF,但Biosensis尚未在内部验证尿液在两种ELISA试剂盒中的应用。强烈建议终端用户进行必要的验证实验,以确保在人尿液中准确定量NGF/前体NGF。请参考最新的BEK-2212(成熟NGF快速ELISA)和BEK-2226(前体NGF快速ELISA)试剂盒说明书,以获取每种基质应用的具体使用指南,特别是血液样本。
成熟NGF ELISA试剂盒包含预包被的小鼠单克隆抗NGF捕获抗体、生物素标记的抗NGF检测抗体以及辣根过氧化物酶(HRP)偶联的链霉亲和素。前体NGF ELISA试剂盒包含预包被的抗前体NGF捕获抗体、生物素标记的抗前体NGF检测抗体以及辣根过氧化物酶(HRP)偶联的链霉亲和素。加入底物(3,3',5,5'-四甲基联苯胺,TMB)后,会生成与样品及蛋白标准品中成熟NGF或前体NGF浓度成正比的有色反应产物。试剂盒还提供了NGF和前体NGF阳性对照(QC样本),以确保实验结果的一致性。
成熟NGF ELISA试剂盒使用了由世界卫生组织(WHO)批准的高质量重组人NGF标准品。前体NGF ELISA试剂盒则包含在大肠杆菌中表达的重组人前体NGF标准品。需要注意的是,虽然本联合试剂盒设计用于检测人蛋白形式,但由于序列同源性,成熟NGF ELISA试剂盒可检测小鼠和大鼠成熟NGF。前体NGF ELISA试剂盒则不会与啮齿动物的前体NGF发生交叉反应。
该联合试剂盒能够区分并独立定量成熟NGF和全长NGF亚型。内部验证数据显示,在成熟NGF ELISA中,人前体NGF蛋白的交叉反应率低于0.1%(在25 ng/mL浓度下,稀释于检测缓冲液中测定),这表明该试剂盒优先定量成熟NGF,而不是全长人前体NGF。Mossa AH等人(2020年)已独立确认成熟NGF ELISA试剂盒中不存在前体NGF的交叉反应。前体NGF ELISA试剂盒中使用的抗体结合在蛋白的前体结构域内,因此可识别前体NGF和前体结构域肽段,但不会与成熟NGF发生交叉反应!
重要提示:在人柠檬酸盐血浆中准确定量NGF需要添加异嗜性抗体阻断剂BL-005-500。在人血清中准确定量前体NGF需要添加异嗜性抗体阻断剂BL-003-1000。这两种异嗜性抗体阻断剂均包含在试剂盒中。
本ELISA试剂盒尚未经过其他应用测试。它仅用于研究目的,不得用于诊断或临床程序。
作为Biosensis在中国的区域总代理,艾美捷科技强烈推荐Biosensis热销产品成熟NGF/proNGF Combo(BEK-2212/2226),人,Rapid ELISA检测试剂盒-2 × 1平板组。产品仅用于科研,不可用于临床诊断。
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成熟NGF/proNGF Combo(BEK-2212/2226),人,Rapid ELISA检测试剂盒-2 × 1平板组:
别名:β-神经生长因子;Ngfb;NGF;前体β-神经生长因子;前体NGF
应用:ELISA
特异性
成熟NGF ELISA:
检测人NGF,并与小鼠和大鼠成熟NGF发生交叉反应。该成熟NGF ELISA优先检测成熟NGF,而不是全长前体NGF。
前体NGF ELISA:
仅检测人前体NGF,不与小鼠和大鼠前体NGF发生交叉反应。前体NGF ELISA试剂盒中使用的捕获抗体和检测抗体均结合在前体NGF的前体结构域内。因此,前体NGF ELISA检测前体NGF的全长形式,而不定量成熟NGF。
物种反应性:人
免疫原描述:请参考BEK-2212和BEK-2226获取具体信息。
检测范围:
成熟NGF:3.9 – 250 pg/mL
前体NGF:0.078 – 5 ng/mL
灵敏度:人成熟NGF的典型检测下限(LOD)为2 pg/mL,以空白值的150%确定。人前体NGF的典型检测下限(LOD)为<60 pg/mL,以空白吸光度值的均值加上3倍标准差(n=10)确定。
监管状态:仅用于研究。
成熟NGF和前体NGF实验设置及NGF亚型交叉反应的图形化展示。BEK-2223将两种实验整合于一个试剂盒中。
这些标准曲线由我们的实验室生成,仅用于展示目的,但可作为预期性能的参考。每次实验均应生成标准曲线。
文献参考:
Please refer to BEK-2212 (Human Mature NGF RapidTM ELISA Kit) and BEK-2226 (Human proNGF RapidTM ELISA Kit).
Biosensis专注于神经科学领域的抗体和试剂的开发,特别是神经营养因子和神经营养因子受体。除神经营养因子,我们的神经科学产品组合还被广泛用于神经退行性疾病、神经发育和神经代谢的研究。重点研究领域包括阿尔茨海默氏症(AD)、帕金森氏症(PD)和肌萎缩侧索硬化(ALS)疾病,以及自噬和代谢应激障碍,包括肥胖、代谢综合征的研究、神经免疫学和炎症。
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