BPS Bioscience Anti-H3K4un单克隆抗体：助力染色质结构研究

组蛋白是真核细胞染色体蛋白部分的主要成分，富含精氨酸和赖氨酸，并在进化过程中高度保守。组蛋白将DNA紧密包装成染色质。每类核心组蛋白H2A、H2B、H3和H4各有两个组装在一起，并被146个碱基对的DNA包裹，形成一个八聚体核小体。组蛋白尾部会发生多种翻译后修饰，这些修饰可以直接或间接改变染色质结构，从而促进转录激活或抑制或其他核过程。除了遗传密码之外，不同组蛋白修饰的组合揭示了所谓的“组蛋白密码”。组蛋白的甲基化和去甲基化分别由组蛋白甲基转移酶和组蛋白去甲基化酶动态调控。针对含有未修饰赖氨酸4（H3K4un）的组蛋白H3的小鼠单克隆抗体，使用KLH偶联的合成肽作为免疫原。  

作为BPS Bioscience在中国的区域总代理，艾美捷科技强烈推荐BPS Bioscience热销产品Anti-H3K4un单克隆抗体。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

Anti-H3K4un单克隆抗体：

克隆性：单克隆  

宿主物种/表达系统：小鼠  

纯化方法：Protein A纯化  

形式：水溶液缓冲液  

配方：含有0.05%叠氮化物和0.05% ProClin 300的PBS溶液  

浓度：50 ?g/50 ?l  

免疫原：合成肽  

储存/稳定性  

在–80°C下可保存长达2年。首次解冻后离心以最大化产品回收。分装以避免反复冻融循环。分装可在–20°C下保存至少一个月。

实验条件  

染色质免疫沉淀（ChIP）结果  

使用HeLa细胞、针对H3K4un的单克隆抗体（产品编号25258）以及优化的qPCR引物集进行染色质免疫沉淀（ChIP）实验。实验中使用10?个细胞的剪切染色质。抗体用量分别为1 ?g、5 ?g和10 ?g/ChIP进行梯度实验分析。以5 ?g IgG作为阴性免疫沉淀（IP）对照。通过qPCR分析，使用特异性引物检测GAPDH启动子和肌红蛋白基因的第2外显子。图1显示了回收率，以输入DNA的百分比表示（免疫沉淀DNA与输入DNA的相对量）。

单克隆抗体的交叉反应性  

为测试特异性，使用针对H3K4un的单克隆抗体（产品编号25258）进行ELISA实验，采用该抗体的系列稀释液。实验中使用了含有未修饰的H3K4区域以及单甲基化、双甲基化和三甲基化H3K4的肽段进行包被。图2显示该抗体对未修饰肽段具有高度特异性。

Western Blot分析  

使用针对H3K4un的单克隆抗体（产品编号25258）对HeLa细胞的组蛋白提取物（15 ?g）进行Western Blot分析，抗体稀释度为1:1,000，使用含有5%脱脂奶粉的TBS-Tween缓冲液。右侧标记了目标蛋白的位置，左侧显示了分子量标记（单位：kDa）。

免疫荧光实验  

使用针对H3K4un的抗体（产品编号25258）和DAPI对HeLa细胞进行染色。细胞用4%甲醛固定10分钟，并用含有5%正常山羊血清和1% BSA的PBS/TX-100进行封闭。细胞用H3K4un抗体（左侧）以1:500的比例稀释在封闭液中进行免疫荧光标记，随后使用与Alexa594偶联的抗小鼠抗体进行二抗标记。中间图显示DAPI对细胞核的染色。右侧图显示了两种染色的合并图像。

应用  

- 染色质免疫沉淀（ChIP）：1 – 5 ?g/ChIP  

- 酶联免疫吸附试验（ELISA）：1:5000  

- Western Blot（WB）：1:1000  

- 免疫荧光（IF）：1:500  

运输温度：–20°C或–80°C  

物种反应性：人  

交叉反应性：仅识别未甲基化的H3K4（H3K4me0），不显著结合甲基化的H3K4（H3K4me1、H3K4me2或H3K4me3）。  

注意事项：每IP的最佳抗体用量应由最终用户确定。建议测试1–5 ?g/IP。  

警告：避免反复冻融循环。  

科学分类：抗体  

监管状态：仅限研究使用

BPS Bioscience是一家通过ISO 9001:2015认证的生命科学领域的供应商，公司一直致力于开发药物研发领域的重组蛋白酶、蛋白酶活性/抑制剂筛选试剂盒和慢病毒等工具。公司由Henry Zhu博士于2005年创立，从创立至今一直致力于提供药物研发领域的创新解决方案，以推动新的药物发现a。公司主要关注的领域包括免疫疗法、表观遗传学、新型冠状病毒、CRISPR、细胞信号转导等，主要提供激酶、磷酸二酯酶、磷酸酶、组蛋白去甲基化酶、组蛋白甲基化转移酶、HDACs、聚ADP核糖聚合酶等。 

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