BPS Bioscience Anti-H3K4me2多克隆抗体：助力表观遗传学研究

针对含有双甲基化赖氨酸4的组蛋白H3（H3K4me2）的多克隆抗体，使用KLH偶联的合成肽作为免疫原。

作为BPS Bioscience在中国的区域总代理，艾美捷科技强烈推荐BPS Bioscience热销产品Anti-H3K4me2多克隆抗体。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

Anti-H3K4me2多克隆抗体：

克隆性：多克隆  

宿主物种/表达系统：兔  

纯化方法：亲和纯化  

形式：水溶液缓冲液  

配方：含有0.05%叠氮化物和0.05% ProClin 300的PBS溶液  

浓度：50 ?g/42 ?l  

免疫原：合成肽  

储存/稳定性  

在–80°C下可保存长达2年。首次解冻后离心以最大化产品回收。分装以避免反复冻融循环。分装可在–20°C下保存至少一个月。

染色质免疫沉淀（ChIP）结果  

使用针对H3K4me2的抗体（产品编号25255）对100万HeLaS3细胞的剪切染色质进行染色质免疫沉淀（ChIP）实验。实验中使用1 ?g、2 ?g、5 ?g和10 ?g的抗体进行梯度实验分析。以2 ?g IgG作为阴性免疫沉淀（IP）对照。通过定量PCR（qPCR）分析，使用特异性引物检测活性GAPDH基因的启动子和编码区、活性c-fos基因的启动子以及非活性TSH2B基因的编码区。图1显示了回收率，以输入DNA的百分比表示（免疫沉淀DNA与输入DNA的相对量）。

染色质免疫沉淀测序（ChIP-seq）结果  

如上所述，使用1 ?g针对H3K4me2的抗体（产品编号25255）进行染色质免疫沉淀（ChIP）。免疫沉淀的DNA在Illumina基因组分析仪上进行分析。文库制备、簇生成和测序均按照制造商的说明进行。使用ELAND算法将36 bp标签与人类基因组对齐。图2展示了完整的X染色体上的峰值分布（图2A）以及围绕GAPDH、c-fos和ACTB基因的3个染色体区域的分布（图2B、C和D，分别）。

滴度测定  

通过ELISA实验测定抗体滴度，使用针对H3K4me2的抗体（产品编号25255）的系列稀释液、粗制血清和流穿液，并在抗原包被的孔中进行检测。实验中使用的抗原是含有目标组蛋白修饰的肽段。通过绘制抗体稀释度与吸光度的关系图（图3），估算抗体的滴度为1:12,600。

交叉反应性测试  

通过点样（Dot Blot）分析测试针对H3K4me2的抗体（产品编号25255）与其他组蛋白H3和H4的修饰以及未修饰H3K4序列的交叉反应性。将含有相应修饰的肽段（100至0.2 pmol）点样于膜上，抗体稀释度为1:20,000。图4显示该抗体对目标修饰具有高度特异性。

Western Blot分析  

对HeLa细胞的组蛋白提取物（15 ?g）进行Western Blot分析，使用针对H3K4me2的抗体（产品编号25255）。抗体稀释度为1:1,000，使用含有5%脱脂奶粉的TBS-Tween缓冲液。右侧标记了目标蛋白的位置，左侧显示了分子量标记（单位：kDa）。

免疫荧光实验  

使用针对H3K4me2的抗体（产品编号25255）和DAPI对人骨肉瘤（U2OS）细胞进行染色。细胞用4%甲醛固定20分钟，并用含有5%正常山羊血清的PBS/TX-100进行封闭。  

图6A：细胞用H3K4me2抗体（左侧）以1:5,000的比例稀释在封闭液中进行免疫荧光标记，随后使用与Alexa568偶联的抗兔抗体进行二抗标记，或用DAPI（右侧）进行染色，特异性标记DNA。  

图6B、C、D和E：分别在抗体与含有未修饰以及单甲基化、双甲基化和三甲基化H3K4的阻断肽（5 ng/?l）孵育后，对细胞进行H3K4me2抗体染色。

应用  

- 染色质免疫沉淀/染色质免疫沉淀测序（ChIP/ChIP-seq）：5 ?g/ChIP  

- 酶联免疫吸附试验（ELISA）：1:500  

- 点样（Dot Blot，DB）：1:20,000  

- Western Blot（WB）：1:1000  

- 免疫荧光（IF）：1:5000  

运输温度：–20°C或–80°C  

物种反应性：人  

注意事项：每IP的最佳抗体用量应由最终用户确定。建议测试1–5 ?g/IP。  

警告：避免反复冻融循环。  

科学分类：抗体  

监管状态：仅限研究使用

BPS Bioscience是一家通过ISO 9001:2015认证的生命科学领域的供应商，公司一直致力于开发药物研发领域的重组蛋白酶、蛋白酶活性/抑制剂筛选试剂盒和慢病毒等工具。公司由Henry Zhu博士于2005年创立，从创立至今一直致力于提供药物研发领域的创新解决方案，以推动新的药物发现a。公司主要关注的领域包括免疫疗法、表观遗传学、新型冠状病毒、CRISPR、细胞信号转导等，主要提供激酶、磷酸二酯酶、磷酸酶、组蛋白去甲基化酶、组蛋白甲基化转移酶、HDACs、聚ADP核糖聚合酶等。 

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