BPS Bioscience Anti-H3K36me2多克隆抗体：多克隆抗体的开发与验证

以兔为宿主制备的针对含有二甲基化赖氨酸36（H3K36me2）的组蛋白H3的多克隆抗体，使用KLH偶联的合成肽作为免疫原。 

作为BPS Bioscience在中国的区域总代理，艾美捷科技强烈推荐BPS Bioscience热销产品Anti-H3K36me2多克隆抗体。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

Anti-H3K36me2多克隆抗体：

克隆性：多克隆  

宿主物种/表达系统：兔  

纯化方法：全血清  

形式：水溶液  

配方：含有0.05%叠氮化物的全兔抗血清  

浓度：100 ?l  

免疫原：合成肽  

储存/稳定性  

在-80°C下可保存长达2年。首次解冻后离心以最大化产品回收。分装以避免反复冻融。分装后可在-20°C下保存至少一个月。  

染色质免疫沉淀（ChIP）实验结果  

使用人HeLa细胞、针对H3K36me2的抗体（产品编号25248）和优化的qPCR引物组合进行ChIP实验。实验使用了10,000个细胞的剪切染色质。抗体用量梯度为1、5和10 ?l/次ChIP实验，并进行了分析。此外，抗体在与5 nmol相应阻断肽室温孵育1小时后，进行了相同的梯度分析。以5 ?g/IP的IgG作为阴性免疫沉淀对照。定量PCR使用了活性基因GAPDH和ALDOA的启动子引物，以及肌生成分化基因（MYOD）的编码区引物。图1显示了回收率，以输入量的百分比表示（免疫沉淀DNA与输入DNA的相对量，经qPCR分析后得出）。  

ChIP-seq实验结果  

使用0.5 ?l针对H3K36me2的抗体（产品编号25248），在100万HeLa细胞的剪切染色质上进行ChIP实验。随后，免疫沉淀的DNA在Illumina基因组分析仪上进行分析。文库制备、簇生成和测序均按照制造商说明进行。36 bp的标签通过ELAND算法与人类基因组比对。图2显示了在染色体20、12和X的3个基因组区域的信号分布。  

抗体滴度测定  

为了测定抗体滴度，使用针对H3K36me2的抗体（产品编号25248）进行ELISA实验，抗体进行梯度稀释。使用的抗原是含有目标组蛋白修饰的肽段。通过绘制吸光度与抗体稀释度的关系图（图3），估计抗体的滴度为1:31,000。  

交叉反应性测试  

使用针对H3K36me2的抗体（产品编号25248）进行点杂交分析，测试其与其他修饰的组蛋白H3肽段以及未修饰序列的交叉反应性。将含有相应组蛋白修饰的肽段（100至0.2 pmol）点在膜上，抗体稀释度为1:100,000。图4显示抗体对目标修饰具有高特异性。  

Western Blot分析  

使用针对H3K36me2的抗体（产品编号25248），对HeLa细胞的组蛋白提取物（15 ?g）进行Western Blot分析。抗体在含有5%脱脂奶粉的TBS-Tween中稀释1:1000。右侧标记了目标蛋白的位置，左侧显示了分子量标记（单位：kDa）。泳道1显示了抗体的Western分析结果；泳道2显示了抗体在与5 nmol相应阻断肽室温孵育1小时后的分析结果。  

免疫荧光分析  

HeLa细胞用针对H3K36me2的抗体（产品编号25248）和DAPI进行染色。细胞用4%甲醛固定10分钟，并用含有5%正常山羊血清和1% BSA的PBS/TX-100进行封闭。细胞用H3K36me2抗体（左侧）在封闭液中稀释1:500进行免疫荧光标记，随后用与Alexa488偶联的抗兔抗体进行二抗标记。中间图显示了DAPI对细胞核的染色。右侧图显示了两种染色的合并图像。  

应用  

ChIP/ChIP-seq（5 ?l/IP）  

ELISA（1:1000）  

点杂交（1:100,000）  

Western Blot（1:1000）  

免疫荧光（1:500）  

运输温度：-20°C或-80°C  

物种反应性：人  

备注：每次免疫沉淀的抗体最佳用量应由终端用户确定。建议测试1 - 5 ?g/次。  

注意事项：避免反复冻融。  

科学分类：抗体  

监管状态：仅限研究使用

BPS Bioscience是一家通过ISO 9001:2015认证的生命科学领域的供应商，公司一直致力于开发药物研发领域的重组蛋白酶、蛋白酶活性/抑制剂筛选试剂盒和慢病毒等工具。公司由Henry Zhu博士于2005年创立，从创立至今一直致力于提供药物研发领域的创新解决方案，以推动新的药物发现a。公司主要关注的领域包括免疫疗法、表观遗传学、新型冠状病毒、CRISPR、细胞信号转导等，主要提供激酶、磷酸二酯酶、磷酸酶、组蛋白去甲基化酶、组蛋白甲基化转移酶、HDACs、聚ADP核糖聚合酶等。 

作为BPS Bioscience在中国的区域代理，艾美捷科技有限公司将为中国客户提供全面的BPS Bioscience以及客户订制化服务。