BPS Bioscience Anti-H2BK12ac多克隆抗体：从ChIP-seq到Western blot的全能选择

多克隆抗体，针对含有乙酰化赖氨酸12（H2BK12ac）的组蛋白H2B区域，使用KLH偶联的合成肽免疫制备。

作为BPS Bioscience在中国的区域总代理，艾美捷科技强烈推荐BPS Bioscience热销产品Anti-H2BK12ac多克隆抗体。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

Anti-H2BK12ac多克隆抗体：

单克隆性：多克隆  

宿主物种/表达系统：兔  

纯化方法：亲和纯化  

形式：水性缓冲溶液  

配方：含有0.05%叠氮化物和0.05% ProClin 300的PBS  

浓度：50 ?g/61 ?l  

免疫原：合成肽  

储存/稳定性  

储存于–80°C，最长可达2年。首次解冻后离心以最大化产品回收率。分装以避免反复冻融循环。分装样本可在–20°C下至少储存一个月。

针对H2BK12ac的抗体的ChIP结果  

使用人类HeLa细胞、针对H2BK12ac的抗体（产品编号25232）以及优化的qPCR引物对进行染色质免疫沉淀（ChIP）实验。实验使用了150万细胞的剪切染色质。实验中使用了0.5、1、2和5 ?g的抗体梯度，并以IgG（1 ?g/IP）作为阴性免疫沉淀对照。qPCR使用特异性引物针对GAPDH和ACTB基因启动子上游约1 kb的区域（作为阳性对照）以及非活性MYOD1基因的编码区和Sat2卫星重复序列（作为阴性对照）。图1显示了回收率，以输入量的百分比表示（免疫沉淀DNA相对于输入DNA的相对量，经qPCR分析后得出）。

针对H2BK12ac的抗体的ChIP-seq结果  

使用0.5 ?g针对H2BK12ac的抗体（产品编号25232），对150万HeLaS3细胞的剪切染色质进行ChIP实验，如上所述。随后，免疫沉淀DNA通过Illumina HiSeq进行分析。文库制备、簇生成和测序均按照制造商的说明进行。51 bp标签通过BWA算法与人类基因组比对。图2显示了整个序列的富集情况以及X染色体上1 Mb区域（图2A和B）和7号染色体上ACTB基因周围区域以及12号染色体上GAPDH基因周围区域的基因组区域（图2C和D）。用于ChIP-qPCR的扩增子位置用箭头表示。

抗体效价测定  

为了测定抗体的效价，采用ELISA方法，使用针对H2BK12ac（产品编号25232）的抗体稀释液在抗原包被的孔中进行检测。所用抗原为含有感兴趣组蛋白修饰的肽。通过绘制吸光度与抗体稀释度的关系图（图3），估计抗体的效价为1:38,200。

针对H2BK12ac的抗体的交叉反应性测试  

为了测试针对H2BK12ac（产品编号25232）的抗体的交叉反应性，采用点样分析法（Dot Blot），使用含有其他组蛋白修饰和未修饰H2B序列的肽。将100至0.2皮摩尔的相应肽点样于膜上。抗体稀释度为1:5,000。图4显示该抗体对感兴趣的修饰具有高特异性。

针对H2BK12ac的抗体的Western blot分析  

采用Western blot方法，对HeLa细胞的全细胞提取物（25 ?g，第1泳道）和组蛋白提取物（15 ?g，第2泳道）以及1 ?g的重组组蛋白H2A、H2B、H3和H4（分别对应第3、4、5和6泳道）进行检测，使用针对H2BK12ac（产品编号25232）的抗体。抗体在含有5%脱脂奶粉的TBS-Tween中稀释1:1,000。左侧显示了标记的分子量（以千道尔顿计）。

应用  

- ChIP/ChIP-seq（0.5 – 1 ?g/ChIP）  

- ELISA（1:1000）  

- 点样分析（DB，1:5000）  

- Western blot（WB，1:1000）  

运输温度：–20°C或–80°C  

物种反应性：人  

注意事项：最终用户应确定每次免疫沉淀的最佳抗体用量。我们建议测试1–5 ?g/IP。  

警告：避免反复冻融循环。  

科学分类：抗体  

监管状态：仅限研究使用

产品数据库：

BPS Bioscience是一家通过ISO 9001:2015认证的生命科学领域的供应商，公司一直致力于开发药物研发领域的重组蛋白酶、蛋白酶活性/抑制剂筛选试剂盒和慢病毒等工具。公司由Henry Zhu博士于2005年创立，从创立至今一直致力于提供药物研发领域的创新解决方案，以推动新的药物发现a。公司主要关注的领域包括免疫疗法、表观遗传学、新型冠状病毒、CRISPR、细胞信号转导等，主要提供激酶、磷酸二酯酶、磷酸酶、组蛋白去甲基化酶、组蛋白甲基化转移酶、HDACs、聚ADP核糖聚合酶等。 

作为BPS Bioscience在中国的区域代理，艾美捷科技有限公司将为中国客户提供全面的BPS Bioscience以及客户订制化服务。