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探索泛素化的奥秘:Enzo泛素化试剂盒助您高效解锁细胞调控机制

发布者:艾美捷科技    发布时间:2025-07-11     
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在细胞生物学领域,泛素化(Ubiquitination)作为一种关键的蛋白质翻译后修饰,调控着DNA修复、信号传导、蛋白质降解等多种细胞过程。其机制涉及E1、E2、E3酶的级联反应,以及多种泛素链类型(如K48、K63链接),直接影响疾病研究和药物开发。Enzo Life Sciences推出的泛素化试剂盒(Ubiquitinylation Kit,货号:BML-UW9920-0001,规格:1Kit),专为体外泛素化实验设计,凭借其标准化组件和卓越性能,已成为全球科研人员的首选工具。本文将深入解析该产品的核心特点、独特优势及前沿应用案例,助您优化实验设计,提升研究效率。

 

产品特点:标准化组件与灵活实验设计

Enzo泛素化试剂盒提供了一套完整的体外泛素化反应体系,确保实验的高效性和可重复性。核心特点包括:  

·全面组件覆盖:Kit包含E1泛素激活酶、E2泛素结合酶(如UbcH5b)、生物素化泛素(Biotinylated Ubiquitin)及反应缓冲液。这简化了实验准备,用户只需添加目标蛋白和E3酶即可启动反应,避免了组分不匹配的风险。证据显示,该Kit支持多种泛素链类型,如K48和K63链接泛素链,适用于不同研究方向。  

·灵活反应体系:实验体积可自由缩放(如从标准30uL缩减至10uL),适配高通量筛选或小规模验证。反应条件优化(30°C或37°C孵育1-3小时)确保高效催化,同时缓冲液配方(含Tris-HCl、MgCl?、DTT和ATP)维持反应稳定性,减少背景噪音。  

·易于检测与纯化:Kit兼容Western blot、质谱等下游分析。生物素化泛素便于使用链霉亲和素检测,而反应产物可直接用于泛素化蛋白的富集和鉴定,提升数据可靠性。

 

产品优势:为何选择Enzo 泛素化试剂盒

该Kit的核心优势在于其高效性、广泛适用性和用户友好性,显著优于同类产品:  

·高效催化与高特异性:Kit的E1/E2酶组合确保了泛素转移的高效率。研究显示,其能在短时间内完成泛素链组装(如3小时内生成清晰的多泛素化条带),且对E3酶底物识别精准,减少非特异性结合。这得益于Enzo对酶活性的严格质控,确保批次间一致性。  

·广泛适用性:Kit已成功应用于多种模式生物,包括植物(如棉花、水稻)、哺乳动物细胞(如淋巴瘤细胞)和体外重组蛋白系统。其兼容性覆盖基础机制研究至疾病模型,无需额外优化。  

·操作简便与成本效益:标准化流程(按制造商说明操作)缩短实验学习曲线,新手也能快速上手。同时,Kit的高效性减少试剂浪费,降低单次实验成本,特别适合预算有限的实验室。

 

应用案例:前沿研究中的成功实践

Enzo泛素化试剂盒已在多篇高影响力文献中发挥关键作用,以下是三个典型案例,展示其在不同领域的应用价值:

1.植物抗病机制研究:棉花防御Verticillium dahliae

·研究背景:棉花中的SINA泛素连接酶在抗真菌感染中起核心作用,但其泛素化机制不明。  

·Kit应用:研究团队使用Enzo Kit(含生物素化泛素和E1/E2酶),在体外验证了MBP-SINA蛋白的泛素化活性。反应在30°C孵育3小时,Western blot检测到清晰的K63泛素链信号,证实SINA通过泛素化增强防御基因表达。  

·成果:该研究发表于《Plant Physiology》,揭示了SINA作为抗病靶点的潜力,为作物育种提供新思路。Kit的高灵敏度确保了低丰度蛋白的可检测性。  

SINA.png

2.癌症信号通路解析:淋巴瘤中RNF181的负调控作用

·研究背景:E3泛素连接酶RNF181在淋巴瘤细胞存活中的作用机制存在争议。  

·Kit应用:团队利用Kit进行体外泛素化实验,缩放反应至10uL,37°C孵育1小时。通过添加K48或K63特异性泛素,证实RNF181促进CARD11蛋白的K48链接泛素化,导致其蛋白酶体降解,从而抑制肿瘤生长。  

·成果:发表于《Cell Reports》,该发现为淋巴瘤治疗提供了新靶点。Kit的灵活性支持了泛素链类型特异性分析,突显其在信号传导研究中的优势。  

RNF181.png

  

3.谷物发育生物学:水稻GW9蛋白调控谷物大小

·研究背景:GW9蛋白影响水稻籽粒大小,但其翻译后修饰机制未明。  

·Kit应用:研究人员采用Kit进行体外泛素化,使用内源UbcH5b作为E2酶,30°C反应后通过抗His/GST抗体检测多泛素化产物。结果证明GW9的泛素化水平决定其稳定性,直接影响籽粒发育。  

·成果:发表于《Nature Communications》,为高产水稻设计提供依据。Kit的标准化组件确保了实验可重复性,适用于植物蛋白的复杂体系。  

MKS1.png

此外,Kit在Wnt信号通路研究中也有应用(如MKS1蛋白泛素化),证实其在发育生物学中的普适性。

 

解锁泛素化研究的未来

Enzo泛素化试剂盒(BML-UW9920-0001)以其高效、灵活和可靠的特点,已成为泛素化研究不可或缺的工具。从植物抗病到癌症治疗,其应用案例彰显了其在推动科学突破中的核心价值。无论您是初入领域的新手,还是寻求高影响力发表的资深研究者,该Kit都能提供标准化解决方案,助您加速发现之旅。立即联系艾美捷科技400-6800-868,体验Enzo的创新力量,让您的科研之路更高效、更精准!

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