产品概述
SUMOylation Kit(货号 BML-UW8955)是艾美捷代理Enzo Life Sciences 推出的一款用于体外生成 SUMO 化蛋白的市场领先试剂盒。该试剂盒通过 SUMO 化酶级联反应,将 SUMO-1、SUMO-2 或 SUMO-3 的羧基末端通过异肽键共价连接到目标蛋白的特定赖氨酸残基上,从而实现体外 SUMO 化修饰。
核心优势
市场最快检测时间:全程仅需不到 1.5 小时,是目前市场上检测速度领先的 SUMO 化试剂盒。
简单四步操作:混合、孵育、终止、检测——四步完成,流程清晰,易于上手。
高特异性与高通量:试剂盒具有高特异性,并可适配高通量检测需求。
兼容多种分析方法:适用于 Western blotting 或蛋白质组学方法进行后续分析。
检测原理与背景
SUMO 化是一种重要的翻译后修饰,通过 SUMO 化酶级联反应将 SUMO 蛋白共价连接到目标蛋白的赖氨酸残基上。一段包含共识序列 ψ-K-X-D/E(其中赖氨酸为被修饰的氨基酸,ψ 为大型疏水残基,X 为任意氨基酸残基)的短序列被认为是体外蛋白 SUMO 化所必需的,但在共识位点不保守的情况下也观察到 SUMO 化现象。
试剂盒提供对照目标蛋白及所有其他必要组分,并附带 SUMO 特异性抗体,用于通过 SDS-PAGE 和 Western blotting 检测 SUMO 化蛋白。规格足够进行 20 次 20 ul反应。
应用方向
该试剂盒支持多种应用场景:
1. 体外 SUMO 修饰特定蛋白:研究 SUMO 化对酶功能、稳定性、蛋白-蛋白相互作用的影响,及其在 p53 肿瘤抑制因子和 NF-κB 通路等细胞过程调控中的作用。
2. 鉴定新蛋白为潜在 SUMO 化靶点:作为研究某蛋白在体内 SUMO 化作用的起点。
3. 生成去 SUMO 化酶的底物:如 SENP1(货号 BML-UW9760)和 SENP2(货号 BML-UW9765)。
4. 检测蛋白的 SUMO E3 连接酶活性:判断其是否促进或增强特定靶蛋白的 SUMO 化,尤其是在更接近体内条件的酶浓度下。
5. 添加已知 SUMO E3 连接酶:促进或增强靶蛋白 SUMO 化,如 RANBP2(货号 BML-UW9455)已被证明是 SP100 SUMO 化的连接酶。
6. 细胞裂解液或粗组分中蛋白的 SUMO 化:便于研究其在复杂溶液中的角色和功能。
7. 特定裂解液中已知蛋白的 SUMO 化验证:可用靶蛋白特异性抗体确认。
8. 以细胞裂解液或粗组分为 SUMO E3 连接酶来源:在试剂盒组分存在下促进纯化靶蛋白的 SUMO 化。
> 注:说明书提供应用 1 的操作流程。其他应用可通过增加、省略或替换特定组分来灵活调整实验设置。
试剂盒组成
20x SUMO 激活酶溶液(SUMO E1):SUMO 激活酶 E1(人源,重组),20 ul
20x SUMO 结合酶溶液(SUMO E2):Ubc9(人源,重组,无标签),20 ul
20x SUMO 酶溶液(SUMO-1、SUMO-2、SUMO-3):各 20 ?l(人源,重组,His 标签)
10x SUMO 化缓冲液,40 ul
20x 对照 RanGAP1 SUMO 化靶蛋白溶液:RanGAP1 片段(人源,重组,GST 标签),20 ul
20x Mg-ATP 溶液,25 ul
SUMO 抗体溶液:SUMO-1(人源)(NT)多克隆抗体,25 ?l;SUMO-2/3(人源)(NT)多克隆抗体,25 ul
规格:足够进行 20 次检测。
操作与储存
使用/稳定性:未开封试剂盒应储存于 -80°C 以确保稳定性和活性。开封后,SUMO 抗体溶液(BML-PW8330 和 BML-PW9465)可储存于 -20°C 或 -80°C,其他组分应储存于 -80°C。
操作注意:避免反复冻融。
长期储存:-80°C
运输:干冰运输
RUO – 仅供科研使用
总结
SUMOylation Kit(BML-UW8955)凭借其 1.5 小时快速检测、四步简单操作、高特异性和高通量兼容性,成为体外 SUMO 化蛋白生成的市场领先工具。其完整的酶级联组分、对照蛋白和特异性抗体,为 SUMO 化修饰研究、E3 连接酶活性检测及去 SUMO 化酶底物制备提供了可靠的一站式解决方案。
文献参考
SENP6 Maintains Mitochondrial Homeostasis by Regulating Mitochondrial Protein Import Through deSUMOylation of TOM40.: Hu, L., Li, J., et al.; Adv. Sci. (Weinh.) 12, e03408 (2025)
SUMOylation of protein phosphatase 5 regulates phosphatase activity and substrate release: Sager, R. A., Backe, S. J., et al.; EMBO Rep. 25, 4636 (2024)
SUMOylation modification of HNRNPK at the K422 site promotes invasion in glioblastoma: Zhao, W., Wang, J., et al.; Int. J. Biol. Sci. 20, 5715 (2024)

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