FLUOR DE LYS SIRT3荧光药物发现检测试剂，信号灵敏、背景低、读数稳定

产品概述

由艾美捷代理Enzo推出的FLUOR DE LYS? SIRT3 荧光药物发现检测试剂盒（货号 BML-AK557）是一款完整的检测系统，专为测量重组人 SIRT3 的赖氨酰脱乙酰酶活性而设计。该试剂盒适用于抑制剂筛选，激活剂筛选以及在不同条件下对酶进行动力学表征，是化学文库高通量筛选的理想工具。

试剂盒提供足够进行96 次检测（1 块 96 孔板）的重组酶，并包含从 p53 和组蛋白乙酰化位点中筛选出的最优底物。

检测原理

本试剂盒基于 FLUOR DE LYS 荧光检测系统，采用底物与显色剂组合的两步法：

第一步：FLUOR DE LYS?-SIRT2 底物（基于 p53 氨基酸 317-320 的独特肽段：Gln-Pro-Lys-Lys(Ac)）与 SIRT3 共同孵育。SIRT3 的脱乙酰酶活性去除赖氨酸残基上的乙酰基，使底物致敏。

第二步：加入 FLUOR DE LYS? Developer II 后，致敏底物被转化为荧光团，通过荧光信号强度即可定量反映 SIRT3 的脱乙酰酶活性。

试剂盒组分

组分 | 货号 | 规格与说明 | 储存条件

SIRT3（人重组） | BML-SE270 | 500 U（1 U=1 pmol/min at 37°C）；溶于 25mM TRIS pH 7.5、100mM NaCl、5mM DTT、10% 甘油 | -70°C

FLUOR DE LYS?-SIRT2 底物 | BML-KI179 | 100 ul，5mM 溶液；注意：该 SIRT2 底物同样可被 SIRT3 水解 | -70°C

FLUOR DE LYS? Developer II 浓缩液（5x） | BML-KI176 | 5×250 ul；使用前用检测缓冲液稀释 | -70°C

NAD（Sirtuin 底物） | BML-KI282 | 500 ul，50mM β-NAD? 氧化型 | -70°C

烟酰胺（Sirtuin 抑制剂） | BML-KI283 | 500 ul，5mM | -70°C

苏拉明钠（Sirtuin 抑制剂） | BML-KI285 | 10 mg 固体，MW 1429.2，溶于水或检测缓冲液 | -70°C

FLUOR DE LYS? 脱乙酰化标准品 | BML-KI142 | 30 ul，10mM DMSO 溶液 | -70°C

Sirtuin 检测缓冲液 | BML-KI286 | 20ml；50mM TRIS pH 8.0、137mM NaCl、2.7mM KCl、1mM MgCl?、1 mg/ml BSA | -70°C

半体积微孔板 | BML-KI101 | — | 室温

半体积白色微孔板 | BML-KI110 | — | 室温

操作注意事项

酶的处理： SIRT3 酶（BML-SE270）需特别小心处理以保持最大酶活性。建议在室温水浴中快速解冻或用手指搓揉解冻，解冻后立即置于冰浴。未使用的酶应快速重新冷冻（液氮或干冰/乙醇浴速冻），并分装保存以减少冻融循环次数。

Developer II 的处理： 5x Developer II（BML-KI176）若解冻过慢易产生沉淀。建议在室温水浴中解冻，解冻后立即转移至冰上。

储存：除微孔板核说明书外，所有组分均应储存于 -70°C（长期储存 -80°C）。运输采用干冰。

SIRT3 背景信息

SIRT3 与 Sir2 及人 SIRT1、SIRT2 同属 I 类 sirtuin 家族。与定位与细胞核的SIRT1和主要定位与细胞质的SIRT2不同，SIRT3以无活性前体蛋白形式合成，其成熟活性形式定位与线粒体基质。

SIRT3的线粒体定位提示了其功能的重要可能性：NAD?/NADH 是线粒体电子传递和 ATP 产生的关键分子，SIRT3 可能通过其对 NAD? 的依赖性充当代谢信号的传感器和转导器。此外，线粒体 NAD? 浓度可能对代谢变化不敏感，但会因线粒体通透性孔的开放而耗竭，因此 SIRT3 也可能作为影响线粒体通透性的凋亡信号调节因子。

应用领域

脱乙酰酶活性检测

基于细胞的检测

荧光检测

高通量筛选

抑制剂/激活剂筛选

酶动力学表征

文献参考Unraveling Small Molecule-Mediated Sirtuin 3 Activation at a Distinct Binding Site for Cardioprotective Therapies: Zhang, D., Zhang, J., et al.; ACS Cent. Sci. 11, 704 (2025)

2-APQC, a small-molecule activator of Sirtuin-3 (SIRT3), alleviates myocardial hypertrophy and fibrosis by regulating mitochondrial homeostasis: Peng, F., Liao, M., et al.; Signal Transduct. Target Ther. 9, 133 (2024)

Tetrahydrocurcumin ameliorates postinfarction cardiac dysfunction and remodeling by inhibiting oxidative stress and preserving mitochondrial function via SIRT3 signaling pathway: B. Zhang, et al.; Phytomedicine 121, 155127 (2023)