BGT-IgM (鸡) ELISA Kit测定程序方案

IgM (鸡) ELISA Kit：用于生物样品中鸡免疫球蛋白M（IgM）的定量测定。是一种高灵敏度的双位点酶联免疫测定法（ELISA），用于测量鸡生物样品中的IgM。如果ELISA在预期用途之外使用，用户可能需要优化saiduse。

艾美捷BGT-IgM (鸡) ELISA Kit：

货号：BGT-KET-131

抗体类型：酶联免疫吸附测定（ELISA）

宿主：山羊

特异性/靶标：免疫球蛋白M（IgM）

规格：1.0

检测范围：3.125 ng/ml - 200 ng/ml

灵敏度：0.979 ng/ml

测定时间：70 分钟

样本类型：血浆、血清

储存条件：2-8°C

试剂准备：

使用前将所有试剂置于室温（16°C至25°C）。

稀释液浓缩物-提供的稀释液是5X浓缩物，必须用蒸馏水或去离子水（1份缓冲液浓缩物，4份dH2O）稀释1/5。

洗涤液浓缩物-提供的洗涤液是20X浓缩物，必须用蒸馏水或去离子水（1份缓冲液浓缩物，19份dH2O）稀释1/20。如果储存温度较低，浓缩物中可能会形成晶体。在稀释前将浓缩物加热至30-35°C可以溶解晶体。

酶-抗体结合物-通过向990?L的1X稀释液中添加10?L的酶-抗体结合物来计算每个微孔板测试条所需的工作结合物溶液量。使用前立即稀释，并避免光照。均匀混合，但要轻柔。避免产生泡沫。

预涂层ELISA微孔板-按提供的状态使用。打开铝箔袋，从袋中取出板。取出在测定中不会使用的条和孔，放回袋中并重新密封，连同干燥剂。

鸡IgM校准物-根据批特定分析证书准备。

测定程序

1.所有样本和标准品都应以双份进行测定。

2.应尽快将标准品和测试样本(们)装入ELISA孔中，以避免吸光度(OD)读数发生偏移。使用多通道移液管可以减少这种情况的发生。

向标准品0（0.0ng/mL）孔中移液100μL，双份

向标准品1（3.13ng/mL）孔中移液100μL，双份

向标准品2（6.25ng/mL）孔中移液100μL，双份

向标准品3（12.50ng/mL）孔中移液100μL，双份

向标准品4（25ng/mL）孔中移液100μL，双份

向标准品5（50ng/mL）孔中移液100μL，双份

向标准品6（100ng/mL）孔中移液100μL，双份

向标准品7（200ng/mL）孔中移液100μL，双份

3.向预先指定的孔中移液100μL的样本（双份）。

4.在室温下孵化微孔板三十（30±2）分钟。保持板盖在孵化期间覆盖并保持水平。

5.孵化后，吸去孔中的内容物。

6.用适当稀释的洗涤液完全填满每个孔，然后吸去。重复三次，共洗涤四次。如果手动洗涤：用洗涤缓冲液完全填满孔，翻转板然后将内容物倒入废液容器中。接着通过在吸水纸上用力敲击孔来去除残留的缓冲液。重复三次，共洗涤四次。

7.向每个孔中移液100μL适当稀释的酶-抗体结合物。在室温下孵化三十（30±2）分钟。保持板盖在黑暗和水平状态下孵化。

8.如步骤5/6所述进行洗涤和吸干孔。

9.向每个孔中移液100μLTMB底物溶液。

10.在黑暗中室温下精确孵化十分钟（10）。

11.十分钟后，向每个孔中添加100μL终止溶液。

12.在30分钟内测定每个孔中内容物的吸光度（450nm）。根据制造商的规格校准板阅读器。

BGT-IgM (鸡) ELISA Kit文献参考：

Khatun, Jannatara et al. Growth Performance, Cytokine Expression, and Immune Responses of Broiler Chickens Fed a Dietary Palm Oil and Sunflower Oil Blend Supplemented With L-Arginine and Varying Concentrations of Vitamin E. Frontiers in veterinary science vol. 7 619. 15 Oct. 2020, doi:10.3389/fvets.2020.00619

Awad EA, Najaa M, Zulaikha ZA, Zulkifli I, Soleimani AF. Effects of heat stress on growth performance, selected physiological and immunological parameters, caecal microflora, and meat quality in two broiler strains. Asian-Australas J Anim Sci. 2020;33(5):778-787. doi:10.5713/ajas.19.0208

Dalia AM, Loh TC, Sazili AQ, Jahromi MF, Samsudin AA. Effects of vitamin E, inorganic selenium, bacterial organic selenium, and their combinations on immunity response in broiler chickens. BMC Vet Res. 2018;14(1):249. Published 2018 Aug 24. doi:10.1186/s12917-018-1578-x

Ojiezeh TI et al. Humoral responses of broiler chickens challenged with NDV following supplemental treatment with extracts of Aloe vera, Alma millsoni, Ganoderma lucidum and Archachatina marginata (Cent Eur J Immunol 2015; 40 (3): 300-306) DOI: https://doi.org/10.5114/ceji.2015.54590