Abbexa/艾美捷人Asprosin ELISA试剂盒，体外定量测定

Asprosin 是哺乳动物在其脂肪（白色脂肪）组织中产生的一种蛋白质激素，可刺激肝脏 将葡萄糖释放到血液中。在这些组织中，asprosin 由基因 FBN1 编码，该基因也编码蛋白质 原纤维蛋白。在肝脏中，asprosin 通过环磷酸腺苷 （cAMP） 依赖性途径激活快速葡萄糖释放。 Asprosin 最初由 Batul Chopra 博士和贝勒医学院的同事鉴定为 C 端切割产物 FBN1基因产物profibrillin。他们在两名先天性部分脂肪营养不良患者中发现了FBN1基因突变，并且 早衰样外观。这两名患者是Lizzie Velasquez和Abby Solomon。这些患者中 FBN1 蛋白的截断 被认为对蛋白质产生有两个后果：突变/截短的原纤维蛋白和非常低的血浆 asprosin 水平 （来自假设的显性负面影响）。此后，这种情况被命名为马方样-早衰-脂肪营养不良综合征。

Abbexa/艾美捷人Asprosin ELISA Kit是一种ELISA试剂盒，用于体外定量测定血清、血浆、细胞培养上清液、组织匀浆、细胞裂解物和其他生物体液中人Asprosin的浓度。低水平的阿斯普罗辛可用于指示马凡脂肪营养不良综合征，高水平的阿斯普罗辛可以在肥胖患者中发现。

Abbexa人Asprosin ELISA试剂盒检测原理：

该试剂盒基于夹心酶联免疫吸附测定技术。将抗体预包被到 96 孔板上。将标准品、测试样品和生物素偶联试剂加入孔中并孵育。然后加入HRP偶联试剂，孵育整个板。在每个阶段使用洗涤缓冲液去除未结合的偶联物。TMB 底物用于定量 HRP 酶促反应。加入TMB底物后，只有含有足够FBN1的孔才会产生蓝色产物，然后在加入酸性终止溶液后变为黄色。黄色的强度与板上结合的 FBN1 量成正比。在酶标仪中以450nm处的分光光度法测量光密度（OD），从中可以计算FBN1的浓度。

试剂制备：

此过程仅供参考。产品手册可能略有不同。产品应按照随附的产品手册上的规定使用，并与产品一起交付。

1）标准品：用推荐体积的标准稀释缓冲液配制标准品，制成标准溶液。然后按照实验方案中的说明，使用标准稀释剂缓冲液对标准溶液进行连续稀释。

2） 洗涤缓冲液：按照实验方案中的说明，用蒸馏水稀释浓缩的洗涤缓冲液。

3）检测试剂制备：计算所需工作液的总体积。稀释检测试剂 A 和检测试剂 B 分别用稀释剂 A 和稀释剂 B 以 1：100 的比例稀释。

检测程序：

此过程仅供参考。产品手册可能略有不同。产品应按照随附的产品手册上的规定使用，并与产品一起交付。

1）制定标准，测试样品和控制井。

2） 将 100 μl 稀释的标准品分装到标准孔中。

3） 将 100 μl 标准稀释缓冲液分装到对照（零）孔中。

4） 将 100 μl 稀释的样品分装到样品孔中。在37°C孵育1小时。

5） 将 100 μl 检测试剂 A 分装到每个孔中。在37°C孵育1小时。

6）洗涤3次。

7） 将 100 μl 检测试剂 B 分装到每个孔中。在37°C孵育30分钟。

8）洗涤5次。

9） 将 90 μl TMB 底物分装到每个孔中。在37°C孵育10-20分钟。

10） 分装 50 μl 终止液。

11） 在 450 nm 处测量外径。

协议：

此过程仅供参考。产品手册可能略有不同。产品应按照随附的产品手册上的规定使用，并与产品一起交付。

使用前将试剂盒组分和样品平衡至室温（18 - 25°C）。建议为每个测试绘制一条标准曲线。

1.在预涂板上分别设置标准、测试样品和对照（零）孔，然后记录它们的位置。建议至少测量每个标准品和样品一式两份。

2. 将 100 μL 每种标准品、对照品和样品加入适当的孔中。用盖子密封板，在 37°C 下孵育 1 小时。

3. 取下盖子，丢弃液体。

4. 向每个孔中加入 100 μl 检测试剂 A 工作溶液。用盖子密封板，在 37°C 下孵育 1 小时。

5. 取下盖子并丢弃溶液。用 1X 洗涤缓冲液洗涤板 3 次。

6. 向每个孔中加入 100 μL 检测试剂 B 工作液，密封并在 37°C 下孵育 30 分钟。

7. 弃去溶液，按照上一步所述用洗涤缓冲液洗涤板 5 次。

8. 将 90 μl TMB 底物分装到每个孔中。用盖子密封板，在 37°C 下孵育 10-20 分钟。避免暴露在光线下。孵育时间仅供参考，最佳时间应由最终用户确定。不要超过 30 分钟。

9. 向每个孔中加入 50 μL 终止液。立即以 450 nm 读取。

结果计算：

计算时，对每个参考标准和每个样品的 O.D.450 重复读数求平均值，然后减去平均对照（零）O.D.450 读数。标准曲线可以绘制为每种参比标准溶液[Y]的相对外径450与每种标准溶液（X）的相应浓度的关系。样品的Asprosin浓度可以从标准曲线中插值。

检测精密度：

测定内精密度（测定内精密度）：在一个平板上分别测试3个低、中、高水平Asprosin样品20次。

批间精密度（测定间精密度）：在 3 个不同的平板上测试 3 个含有低、中、高水平 Asprosin 的样品，每个平板重复 8 次。

CV （%） =（标准偏差/平均值） × 100 批内：CV<10%批间：CV<12%

仅供研究使用。 范围和灵敏度可能会发生变化。

作为在中国的区域Abbexa代理，艾美捷将为中国客户提供全面的Abbexa产品以及客户订制化服务。