抗Aβ寡聚体特异性单抗（OMAB），适配敏感检测体系与活细胞实验

1. 产品概述

本品为艾美捷代理Agrisera推出的抗Aβ寡聚体特异性单抗（OMAB）（货号：AS10 932），以人源Aβ（1-40/42）部分聚集重组肽段（分子量4.5 kDa，氨基酸序列覆盖全长）为免疫原，识别表位为第3–8位氨基酸。经离子交换层析亲和纯化，以冻干粉形式提供，每瓶50 ug。该抗体基于亲合力与单体亲和力差异的设计原理，实现对Aβ寡聚体的高选择性识别。

2. 重构与存储规范

重构方法：加入100 ?l无菌水，充分溶解至原体积。

存储条件：冻干粉或重构后于4°C保存（无需冷冻）。

使用前：开管前短暂离心，确保管壁及管盖附着物沉至管底，避免材料损失。

缓冲体系：本品溶于PBS pH 7.4，不含载体蛋白及叠氮钠。

3. 应用与稀释

已验证应用：ELISA、免疫荧光（IF）、免疫组织化学（IHC）。

推荐稀释度：

ELISA（包被抗体）：2 ug/ml；

IF：1 : 1000；

IHC：1 : 500。

孵育时间：OMAB抗体与Aβ寡聚体在室温下结合约需15分钟。

预期分子量：免疫原分子量4.5 kDa（注：此为目标肽段分子量，非抗体分子量）。

4. 反应特异性

已验证反应种属/靶标：人源Aβ寡聚体（特异性识别寡聚体形式）。

预测反应种属：大鼠（基于序列同源性预测）。

无反应种属/靶标：目前未发现已知的预测反应例外。

重要区分说明：纤维体（fibrils）不可被OMAB抗体识别。若需区分寡聚体与纤维体，推荐使用斑点印迹（dot blot）：起始抗原上样量500 ng/spot，进行2倍梯度稀释；封闭液选用脱脂牛奶，洗液为含0.3% Tween 20的TBS（pH 7.4）。

5. 背景与应用价值

可溶性Aβ寡聚体目前被认为是阿尔茨海默病病理学的直接致病因子，因此成为极具吸引力的治疗靶点。然而，Aβ寡聚体的鉴定因自身不稳定性及低丰度而存在技术挑战。OMAB抗体基于IgM亚型设计，利用高亲合力（avidity）与极低单体亲和力（monovalent affinity）相结合的策略，实现对寡聚体组分的高选择性，同时最大程度减少对单体的交叉反应。

6. 双抗体夹心ELISA原理与优化要点

OMAB抗体尤其适用于构建高特异性寡聚体检测体系，其核心设计原理如下：

特异性来源：采用捕获抗体-检测抗体的夹心配置，要求抗原具备多价结合能力（二价或更高）。该策略无法通过直接将寡聚体包被于固相表面实现，因为后者无法区分寡聚体与吸附的单体。

亲合力放大效应：以OMAB抗体作为捕获抗体，寡聚体（多价）通过亲合力效应被强烈结合，而单体（单价）结合极弱。该亲合力放大效应可使信号差异超过1000倍。

检测抗体选择：可使用生物素化版本的捕获抗体，或采用其他物种来源的多克隆抗体进行检测。

浓度窗口优化：需通过样品梯度滴定，确定寡聚体结合较强而单体结合可忽略的最佳浓度区间。详细设计原理参见Br?nnstr?m et al. 2014。

总结：本品适用于人源Aβ寡聚体的特异性检测（ELISA/IF/IHC），基于IgM高亲合力设计实现寡聚体与单体的高效区分，推荐用于阿尔茨海默病相关寡聚体病理研究。4°C保存，重构后无需冷冻，注意纤维体不可被该抗体识别，需改用斑点印迹法进行区分。