抗VDAC1-5抗体--线粒体外膜广谱标记物，覆盖多种高等植物及二维BN-PAGE应用

产品概述

由艾美捷代理推出的抗VDAC1-5（电压依赖性阴离子通道蛋白1-5）抗体（货号：AS07 212）是一款兔源多克隆抗体，免疫原为KLH偶联的合成多肽，该多肽序列在目前已发现的所有高等植物VDAC蛋白中高度保守，涵盖拟南芥全部5个成员（VDAC1–5，详见产品信息）。抗体经免疫原亲和纯化，以冻干形式提供于PBS pH 7.4缓冲体系中，每支规格为50 ug。推荐复溶体积为50 ul无菌水，复溶后浓度约为1 ug/ul。建议分装保存于-20°C，避免反复冻融；开盖前请短暂离心。

分子量与识别特性

参数 | 数值/说明

预期/表观分子量（拟南芥） | 约29 kDa

细胞定位 | 线粒体外膜（专属Western blot区室标记物）

识别表位 | 高等植物VDAC1–5共有保守序列

该抗体可同时识别拟南芥所有5个VDAC亚型，在常规SDS-PAGE中呈现单一条带，适用于总线粒体含量评估。

推荐应用与稀释比例

应用 | 推荐稀释度/用量

免疫定位（IL） | 1 : 500

蛋白质印迹（WB） | 1 : 5000（每孔上样2–30 ?g蛋白）

二维BN/SDS-PAGE | 详见Piechota等（2010）方法

物种反应性详述

该抗体在高等植物中具有极为广泛的适用性，具体反应范围如下：

反应类型 | 代表性物种

已验证反应性 | 拟南芥、水稻、玉米、菠菜、番茄、甜菜、花椰菜、芜菁、柑橘、金桔、罂粟（花粉管）、小立碗藓、长芒苋

预测反应性 | 油菜、大豆、棉花、烟草、马铃薯、小麦、高粱、葡萄、豌豆、菜豆、蓖麻、木薯、麻风树、冰叶日中花、蒺藜苜蓿、大车前、白杨、碧桃、可可、拟南芥近缘种等

已确认无反应性 | 莱茵衣藻、大豆（部分品种）、硅藻、苹果、酿酒酵母

*注：大豆同时出现在预测反应性和无反应性列表中，可能与品种或组织特异性相关，建议以实验验证为准。

蛋白背景与功能定位

VDAC（电压依赖性阴离子通道），亦称线粒体孔蛋白，是定位于线粒体外膜上的β-桶状扩散孔道蛋白。其主要功能包括：

介导线粒体与胞质间ATP、ADP、无机磷酸及代谢中间产物的跨膜交换；

参与线粒体通透性转换及细胞凋亡调控。

VDAC家族在拟南芥中有5个成员（VDAC1–5），不同成员可能在组织分布、胁迫响应及代谢调控中具有非冗余功能。本抗体识别5个成员共有的保守表位，检测结果反映VDAC家族总体蛋白水平。

核心应用场景与实验要点

1. 线粒体富集效率评估（WB定量）

作为线粒体外膜标记物，本抗体可用于：

评估线粒体分离/富集流程的效率——比较总蛋白与线粒体组分中VDAC信号强度；

定量线粒体蛋白上样量——根据产品信息，线粒体组分检测推荐上样量仅为2–10 ?g，提示该抗体灵敏度高，是微量线粒体样本的理想检测工具。

操作建议：

常规总蛋白WB推荐上样量20–30 ?g，线粒体富集组分可降至2–10 ?g；

一抗1:5000稀释，建议孵育4°C过夜以获得最佳信噪比；

可搭配胞质标记物（如HSP70、Actin）进行平行检测，验证分馏纯度。

2. 二维BN/SDS-PAGE（复合体分析）

该抗体可与蓝色天然PAGE联用，用于检测VDAC在线粒体外膜中的寡聚状态及与其他蛋白的相互作用。详细的二维BN/SDS-PAGE方法学参照Piechota等（2010）文献。此类应用适用于：

分析VDAC在不同生理条件下的聚集/解聚状态；

研究VDAC与线粒体其他膜蛋白（如TOM复合体、ANT）的相互作用。

3. 免疫定位（IL）与花粉管研究

本抗体已成功应用于罂粟花粉管的免疫定位实验，操作方法和图像可在指定资源中查阅。建议稀释度1:500，需配合适当固定和通透条件。在此类应用中，VDAC作为线粒体分布的空间标记，可用于追踪花粉管生长过程中线粒体的动态重排。

实验关键注意事项

1. 物种局限性：本抗体不适用于衣藻、硅藻、酵母及苹果，请避免在这些物种中使用。

2. 上样量优化：WB稀释度固定为1:5000，但上样蛋白量需在2–30 ug范围内根据样本类型（总蛋白vs线粒体组分）进行优化。

3. 阳性对照：推荐使用拟南芥幼苗线粒体富集组分作为阳性对照。

4. 储存：复溶后分装保存于-20°C，避免反复冻融。

总结

AS07 212 抗体是一款针对高等植物VDAC1–5家族的高亲和力、广谱检测工具，其核心价值在于：

线粒体外膜专属标记：适用于线粒体富集效率评估及亚细胞定位；

家族全覆盖：识别拟南芥全部5个VDAC成员，反映总体线粒体含量；

多平台兼容：支持WB、IL及二维BN/SDS-PAGE，适用于复合体分析；

跨物种广泛性：覆盖单/双子叶、苔藓及多种作物。

该抗体是植物线粒体生物学研究的基础工具，尤其在能量代谢分析、胁迫响应中线粒体动态监测，以及花粉管生长等发育生物学研究中具有重要应用价值。如需详细实验方案或特殊物种验证，请参考完整产品说明书或联系技术支持团队。

文献参考：

Holzner et al. (2026). The chloroplast ionome shines light on the dynamics of organellar iron homeostasis. Plant Cell. 2026 Jan 29:koag017. doi: 10.1093/plcell/koag017.

Iglesias-Sanchez et al. (2025).Activation of Alternative Oxidase Ensures Carbon Supply for Ethylene and Carotenoid Biosynthesis During Tomato Fruit Ripening. Plant Physiol. 2025 Oct 31;199(3):kiaf516. doi: 10.1093/plphys/kiaf516.

Konishi and Noguchi (2025). The Mitochondrial Respiratory Chain is Important as an Electron Sink to Avoid Over-Reduction of Chloroplasts in Arabidopsis thaliana Leaves under High-Light Stress. Plant Cell Physiol. 2025 Jun 5:pcaf062. doi: 10.1093/pcp/pcaf062.