ALPCO 胰岛素化学发光ELISA试剂盒(10板)的检测原理及结果计算

ALPCO胰岛素化学发光酶联免疫吸附测定（ELISA）用于定量检测人血清、肝素化血浆和细胞培养上清液中的胰岛素。

作为ALPCO在中国的区域总代理，艾美捷科技强烈推荐ALPCO热销产品胰岛素化学发光ELISA试剂盒(10板)。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

胰岛素化学发光ELISA试剂盒(10板)检测原理：

ALPCO胰岛素化学发光ELISA是一种夹心免疫分析法。96孔微孔板涂有一层特异性针对胰岛素的单克隆抗体。将标准品、质控品和样品与结合物一起加入微孔板孔中，然后在室温下于微孔板振荡器上以700-900转/分钟的速度孵育。第一次孵育完成后，用洗涤缓冲液清洗孔并吸干。然后加入链霉亲和素-辣根过氧化物酶（SA-HRP）进行第二次室温孵育，孵育时微孔板振荡器速度为700-900转/分钟。孵育完成后，再次用洗涤缓冲液清洗孔并吸干。加入化学发光底物，5分钟后用化学发光微孔板读数仪读取结果。产生的光强度与样品中胰岛素的量成正比。  

*请参考每套试剂盒附带的分析证书以获取更多信息。

所需材料 

- 精密移液器，用于分装10-100微升（配一次性吸头）  

- 重复或多通道移液器，用于分装最多100微升  

- 容量瓶和移液器，用于试剂配制  

- 蒸馏水或去离子水，用于试剂配制  

- 微孔板清洗器或洗瓶  

- 能达到700-900转/分钟的微孔板振荡器  

- 配有化学发光检测功能的微孔板读数仪

注意事项 

1. 本试剂盒中包含的人类血液制品已检测HIV（人类免疫缺陷病毒）、HBV（乙型肝炎病毒）和HCV（丙型肝炎病毒）。这些病毒的检测方法不能保证病毒的完全不存在，因此所有试剂应被视为潜在传染性物质。处理和丢弃应遵守所有适用的国家和地方关于潜在生物危害材料处理的规定。  

2. 来自动物源的所有材料均为疯牛病（BSE）阴性。然而，所有材料仍应被视为潜在传染性物质。  

3. 避免与皮肤直接接触。  

4. 本产品不可内服。  

5. 使用本产品时，避免进食、饮水或吸烟。  

6. 不要使用嘴进行任何试剂的移液操作。  

7. 本试剂盒中的试剂具有批号特异性，不得替换。  

8. 不要使用过期的试剂。  

9. 不建议对检测程序进行更改，这可能会影响检测结果。  

10. 附录中提供了用于读取化学发光输出的仪器设置示例。每个实验室应根据仪器制造商的说明优化其仪器设置。请与微孔板读数仪制造商的技术服务部门联系，以获取最佳仪器设置。

典型标准曲线 

以下结果仅用于演示目的，不能代替通过检测获得的数据。每次检测运行和测试的板都需要进行标准曲线检测，数据分析采用1/y?加权的五参数曲线拟合。

储存条件 

试剂盒应储存于2-8°C。试剂盒有效期至包装标签上的过期日期。

结果计算 

根据标准品构建标准曲线。建议使用软件程序计算标准曲线并确定样品浓度。推荐使用1/y?加权的五参数曲线拟合进行数据分析。  

胰岛素化学发光ELISA是一种配体结合分析法，其反应与分析物浓度呈S形关系。目前接受的此类曲线参考模型使用四参数或五参数逻辑斯蒂（PL）拟合，因为这些模型能够在更广泛的范围内优化准确性和精确性。  

使用1/y?加权的五参数曲线拟合是为了最大化低浓度样品的准确性和精确性。然而，由于个体实验室条件的影响，所有模型在可检测范围的最低端和最高端的准确性和精确性都受到限制。因此，在解释分析物反应呈非线性时，应始终谨慎。  

不建议将样品浓度值外推到标准浓度范围之外。

预期值 

胰岛素化学发光ELISA已校准至WHO胰岛素第一国际参考制剂66/304。  

人胰岛素从pg/mL换算到?IU/mL（微国际单位）的换算关系为：  

34.8 pg/mL = 1 ?IU/mL  

34.8 ?g = 1 IU = 6 nmol

文献参考：

1. Finlay JWA, Dillard RF. Appropriate Calibration Curve Fitting in Ligand Binding Assays.AAPS Journal. 2007; 9(2): E260-E267. 

ALPCO产品种类多样，可测样品来源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、猪、羊、狗、猴等，涉及神经生物学、骨代谢、心血管疾病和氧化应激、细胞因子与信号转导、糖尿病和肥胖症、内分泌学、甲状腺功能、肠胃病学、免疫学、生殖激素、抗体和抗原、分子诊断等多个研究领域，尤以糖尿病和肥胖症研究领域见长。

作为ALPCO在中国区域的代理，艾美捷科技有限公司将为中国客户提供全面的ALPCO产品。