ALPCO 大鼠α2-巨球蛋白ELISA试剂盒，96孔检测原理和注意事项说明

α2-巨球蛋白ELISA是一种高灵敏度的双位点酶联免疫测定法（ELISA）用于测定大鼠血清和血浆中的α2-巨球蛋白。用于研究仅限使用。不用于诊断程序。

作为ALPCO在中国的区域总代理，艾美捷科技强烈推荐ALPCO热销产品大鼠α2-巨球蛋白ELISA试剂盒，96孔。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

大鼠α2-巨球蛋白ELISA试剂盒，96孔检测原理：

双抗体夹心酶联免疫吸附测定的原理在图1中表示。在这种测定中，样品中的α2-巨球蛋白（A2M）与已吸附到聚苯乙烯微孔板表面的抗A2M抗体发生反应。通过洗涤去除未结合的蛋白质后，加入与辣根过氧化物酶（HRP）结合的抗A2M抗体。这些酶标记的抗体与之前结合的A2M形成复合物。经过另一次洗涤步骤后，通过添加显色底物3,3',5,5'-四甲基联苯胺（TMB）来测定结合的酶。结合的酶量与测试样品中A2M的浓度直接相关；因此，450纳米处的吸光度是测试样品中α2-巨球蛋白浓度的量度。测试样品中A2M的量可以从标准品构建的标准曲线中插值得到，并根据样品稀释进行校正。

程序的局限性：

当完全理解了说明书中的信息，并遵循良好的实验室操作规范时，将获得可靠和可重复的结果。可能影响测定性能的因素包括仪器功能、玻璃器皿的清洁度、蒸馏水或去离子水的质量、试剂和样品移液的准确性、洗涤技术、孵育时间或温度。不要将试剂与其他批次或来源的试剂混合或替换。

样品收集和处理：

所有血液成分和生物材料应视为潜在危险。处理和处置时遵循通用预防措施。如果血液样品出现凝块、严重溶血、脂血，或样品的完整性受到关注，请做记录，并谨慎解释结果。下面列出的样品收集和储存条件是一般性指导。尚未评估样品的稳定性。

? 血清样品 - 应通过静脉采血。血凝块形成后通过离心分离血清。取出血清立即进行测定或分装并储存于-80°C（最好）或-20°C。避免反复冻融循环。

? 血浆样品 - 血液应收集到含有抗凝剂的容器中，然后进行离心。立即进行测定或分装并储存于-80°C（最好）或-20°C。避免反复冻融循环。

? 已知干扰物质 - 浓度高于0.1%的叠氮化物和硫柳汞会抑制酶反应。

样品稀释：

测定要求每个样品在使用前进行稀释。每次进行测定时，所有样品都应以双份进行测定。推荐的稀释比例仅供参考。稀释应基于未知样品的预期浓度，使稀释后的样品落在标准曲线的动态范围内。如果不确定样品水平，在运行整个板之前，强烈建议对一个或两个代表性样品进行系列稀释。

血浆和血清样品 - 推荐的起始稀释比例为1:3000。要准备1:3000的样品稀释液，将5微升样品转移到495微升1倍工作稀释液中。这得到1:100的稀释。接下来，将1:100的样品通过将10微升转移到290微升1倍工作稀释液中进行稀释。这得到样品的1:3000稀释。每个阶段都要彻底混合。

结果计算

1. 从每个孔的测试值中减去平均背景值（标准零的平均吸光度读数）。

2. 对每个标准的平均重复读数进行平均，并使用结果构建标准曲线。通过使用能够生成四参数逻辑曲线拟合的计算机软件来减少数据，构建标准曲线。也可以使用二阶多项式（二次）或其他曲线拟合；然而，它们对数据的拟合将不够精确。

3. 从标准曲线中插值得到测试样品值。校正血清稀释因子，以得到原始样品中α2-巨球蛋白的浓度。

附录A 参考血清信息

本试剂盒中包含一瓶参考血清。

请参阅随附的产品概况表以获取特定批次的信息。

请注意以下事项：

1. 收到参考血清后应立即冷冻。如果储存得当，它在有效期前都是稳定的。

2. 参考血清应适当稀释，以适应标准曲线范围。有关说明，请参考协议中的“样品稀释”部分。

3. 在移液样品（程序部分）的同时，也应以双份移液参考血清。

ALPCO产品种类多样，可测样品来源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、猪、羊、狗、猴等，涉及神经生物学、骨代谢、心血管疾病和氧化应激、细胞因子与信号转导、糖尿病和肥胖症、内分泌学、甲状腺功能、肠胃病学、免疫学、生殖激素、抗体和抗原、分子诊断等多个研究领域，尤以糖尿病和肥胖症研究领域见长。

作为ALPCO在中国区域的代理，艾美捷科技有限公司将为中国客户提供全面的ALPCO产品。