Progranulin也被称为Granulin Epithelin前体、Proepithelin或Acrogranin。它是一种68.5kDa的蛋白质,由593个氨基酸(包括信号肽)组成,在体内以高度糖基化的形式出现,因此其大小约为90 kDa(1)。Progranulin有七个保守的结构域,由连接序列分隔。通过蛋白酶如弹性蛋白酶催化的蛋白水解切割,产生6-25 kDa的大型片段,这些片段被称为Granulines或Epithelines。Progranulin在增殖能力强的组织中表达和分泌,如腺样组织、脾脏、皮肤上皮、胃肠道粘膜、造血细胞和肿瘤细胞。到目前为止,还没有发现特定的受体,这些受体能获得Progranulin或Granulines的效应(2, 3)。
Progranulin似乎是一个积极影响伤口愈合的因素。在皮肤损伤的情况下,角化细胞、巨噬细胞和中性粒细胞中的表达增加。Progranulin通过激活巨噬细胞和刺激受损组织中的血管生成间接影响伤口愈合(4)。Progranulin和Granulines的生理效应是相反的。Progranulin可以抑制TNFα介导的促炎过程。另一方面,Granulines似乎刺激促炎细胞因子的分泌。Progranulin对炎症过程的影响也可以在动脉粥样硬化斑块中显示出来。在这里,Progranulin由平滑肌细胞表达,并影响单核细胞和平滑肌细胞的迁移(5)。在中枢神经系统中,Progranulin在小胶质细胞和神经元中表达(在新皮质和海马锥体细胞以及小脑的浦肯野细胞中)。此外,Progranulin似乎与产前和产后发育期间性别特异性差异的发展以及成人的神经可塑性有关。
人Progranulin ELISA旨在用于测量人血清和血浆样本中的Progranolin。仅供研究使用。不用于诊断程序。
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产品名称 | 货号 | 详情 |
Progranulin ELISA, 96孔 | ALP-22-PRGHU-E01 | 查看 |
典型标准曲线示例
以下数据仅用于演示,不能代替分析时生成的数据。
图1. 示范性标准曲线,采用多项式3作为曲线拟合。
图1中展示的示范性标准曲线不能用于计算您的测试结果。您必须为每次进行的测试建立一个标准曲线。示范性计算1:41稀释样本的Progranulin浓度:样本测量吸光度0.56,空白测量吸光度0.03。您的测量程序将通过使用样本和空白之间的差异(0.03)来自动计算稀释样本的Progranulin浓度。您只需要确定最适合的曲线拟合(这里:三度多项式)。
标准品和对照品
对于重组冻干的标准品A-E,必须使用稀释缓冲液VP。冻干的对照血清KS1和KS2必须用稀释缓冲液VP重组。稀释应根据相应样本的稀释比例进行。建议将重组后的试剂在室温下放置15分钟,然后使用涡旋混合器彻底但轻柔地(无泡沫)混合。重组后的标准品和对照品可以在-20°C下储存2个月。应避免反复冻融。
洗涤缓冲液
所需的洗涤缓冲液体积是通过将提供的20倍浓缩液与去离子水按1:20稀释来准备的。稀释后的洗涤缓冲液在2-8°C下稳定4周。使用时必须处于室温。
微孔板
将未使用的微孔板条和孔与干燥剂一起存放在紧闭的夹锁袋中,在2-8°C下使用提供的框架。正确储存的情况下,标签上的有效期不会受到影响。
底物溶液
底物溶液(S),稳定的H2O2-四甲基联苯胺,对光敏感——存放和孵育时应避光。
测定程序
进行测定时,标准品A-E、对照血清KS1& KS2和样本应尽可能快地(例如,15分钟内)移液。为避免由于孵育时间差异导致的失真,酶结合物EK以及随后的底物溶液S应与样本以相同的顺序和相同的时间间隔添加到板中。停止溶液SL应与底物溶液S以相同的顺序添加到板中。所有测定(标准品、对照血清和样本)应进行双重测定。
文献参考:
1. Daniel R, Daniels E, He Z, Bateman A. Progranulin (acrogranin/PC cell-derived growthfactor/granulin-epithelin precursor) is expressed in the placenta, epidermis,microvasculature, and brain during murine development. Dev Dyn 2003;227:593-9.
2. Eriksen JL, Mackenzie IR. Progranulin: normal function and role in neurodegeneration. JNeurochem 2008;104:287-97.
3. Daniel R, He Z, Carmichael KP, Halper J, Bateman A. Cellular localization of geneexpression for progranulin. J Histochem Cytochem 2000;48:999-1009.
4. Zhu J, Nathan C, Jin W, Sim D, Ashcroft GS, Wahl SM, et al. Conversion of proepithelin toepithelins: roles of SLPI and elastase in host defense and wound repair. Cell 2002;111:867-78.
5. Kojima Y, Ono K, Inoue K, Takagi Y, Kikuta K, Nishimura M, et al. Progranulin expression inadvanced human atherosclerotic plaque. Atherosclerosis 2009;206:102-8.
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