IGFBP-3 酶联免疫吸附测定试剂盒用于定量测定人血清、肝素或 EDTA 血浆中的胰岛素样生长因子结合蛋白 3(IGFBP-3)。仅限研究使用。不用于诊断程序。
胰岛素样生长因子(IGF)-I 和 -II 在循环中与特定的结合蛋白(IGFBPs)结合。迄今为止,至少可以根据它们的氨基酸序列区分出六种结合蛋白。它们被指定为 IGFBP-1、IGFBP-2 至 IGPBP-7(1-2)。血液中主要的 IGFBP 是 IGFBP-3,它在很大程度上决定了总 IGF-I 和 IGF-II 的浓度。与其他结合蛋白不同,IGFBP-3 具有在结合 IGF-I 或 IGF-II 后与酸性不稳定的非结合亚基(ALS)结合的特性(3-5)。血浆中的大部分 IGFBP-3 以高分子量三元复合物的形式存在,但也发现了少量的游离 IGFBP-3(6,7)。针对 IGFBP-3 的特异性免疫测定法的发展,识别完整的高分子量复合物,为三元复合物调节提供了新的见解(6-9)。超过 24 小时的测量显示了恒定的昼夜水平(12,13)。
作为ALPCO在中国的区域总代理,艾美捷科技强烈推荐ALPCO热销产品igfbp - 3eia(96孔)。产品仅用于科研,不可用于临床诊断。
产品名称 | 货号 | 详情 |
igfbp - 3eia(96孔) | ALP-22-BP3HU-E01 | 查看 |
igfbp - 3eia(96孔)检测原理:
IGFBP-3 ELISA是一种夹心法。它利用两种特定的高亲和力抗体。首先,样品中的IGFBP-3与微量滴定板上的固定抗体结合。在接下来的步骤中,生物素化的抗IGFBP-3抗体和链霉抗生物素蛋白过氧化物酶的复合物依次与固定的IGFBP-3结合。随后,过氧化物酶催化酶反应,导致鲜艳的颜色。蓝色的强度取决于样品的IGFBP-3含量。通过加入终止溶液来终止反应,并通过测量吸收来量化颜色强度。
样本:
样本类型
血清和血浆
血清和肝素/EDTA 血浆产生可比的值。
样本收集
使用标准的静脉穿刺进行血液采样。必须避免溶血反应。
所需样本体积:10 ?L
样本稳定性:
在密封良好的样本瓶中
? 20-25°C 储存:3 天
? -20°C 储存:2 年
? 最多冷冻-解冻周期:10 次
在 -20°C 下储存样本超过 2 年对读数没有影响。
应尽量减少样本的冷冻和解冻。10 次冷冻-解冻周期对样本没有影响。
干扰:
样本中的甘油三酯、胆红素和血红蛋白在 100 mg/mL、100 ?g/mL 或 5 mg/mL 的浓度下不会干扰。然而,应由用户验证溶血、脂血或黄疸样本的使用。
样本稀释:
? 稀释:1:505,使用样本缓冲液 SB
? 在 PE/PP 管中取 1 mL 样本缓冲液 SB(红色)(在较大系列中推荐使用多步稀释器),加入 10 ?L 血清或血浆(稀释因子 101)。在另一个 PE/PP 管中加入 400 ?L 样本缓冲液 SB 和 100 ?L 彻底混合的第一次稀释液(稀释因子 5)。混合后,在测定中使用 50 ?L 这种 1:505 稀释的溶液,测定前不超过 1 小时。
? 样本稀释后的稳定性:在 20-25°C 下最多 1 小时。
典型标准曲线的例子
以下数据仅供演示,不能在实验时代替数据生成。
图1:示例性标准曲线
文献参考:
1) Ballard J, Baxter R, Binoux M, Clemmons D, Drop S, Hall K, Hintz R, Rechler M, Rutanen E,Schwander J (1989) On the nomenclature of the IGF binding proteins. Acta Endocrinol (Copenh)121:751-752
2) Wilson EM, Oh Y, Rosenfeld RG (1997) Generation and characterization of an IGFBP-7 antibody:Identification of 31 kD IGFBP-7 in human biological fluids and Hs578T human breast cancerconditioned media. J Clin Endocrinol Metab Vol 82, 4:1301-1303
3) Baxter RC (1988) Characterization of the acid-labile subunit of the growth hormone-dependentinsulin-like growth factor binding protein complex. J Clin Endocrinol Metab 67:265-272
4) Baxter RC, Martin JL (1989) Structure of the Mr 140,000 growth hormone dependent insulin-likegrowth factor binding protein complex: determinati-on by reconstitution and affinity-labeling. ProcNatl Acad Sci USA 86:6898-6902
5) Holman SR, Baxter RC (1996) Insulin-like growth factor-binding protein-3: factors affecting binaryand ternary complex formation. Growth Regulation 6: 42-47.6) Baxter RC, Martin J (198
6): Radioimmunassay of growth hormone-dependent insulin-like growthfactor binding protein in human plasma. J Clin Invest 78:1504-1512
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