ALPCO EPO(促红细胞生成素)EIA*， 96孔，IVD使用方案

促红细胞生成素（EPO）是一种重度糖基化的蛋白质，分子量约为30-34千道尔顿。人类EPO是一种由165个氨基酸组成的多肽，包含一个O-连接和三个N-连接的糖链。重组EPO是天然蛋白的良好替代品，可用于免疫测定。血清EPO水平取决于蛋白质的产生速率和清除速率。90%的EPO是在成年肾脏的近曲小管细胞中产生的，这是对组织氧合减少的反应。有证据表明，这些细胞上检测血液氧饱和度的蛋白质是一个含有血红素的基团。随着血浆中pO2的降低，作为红细胞比容的函数，EPO浓度将会增加。观察结果也表明，正常情况下，血清EPO水平与红细胞质量之间存在负相关。血清促红细胞生成素浓度的定量检测作为诊断辅助手段，用于确定贫血或红细胞增多症的原因。再生障碍性贫血、溶血性贫血和缺铁性贫血都会导致血清EPO升高。然而，由于肾脏疾病如肾衰竭和其他疾病（如获得性免疫缺陷综合征AIDS）导致的继发性贫血患者，其EPO水平通常不适当地低于贫血程度。这很可能是由于患病肾脏产生足够数量EPO的能力受损。低浓度的EPO可能提供肾脏移植排斥反应的早期警告。EPO也可用于监测接受齐多夫定（AZT）治疗的AIDS患者。EPO浓度的增加证实了与AZT治疗相关的贫血是由于红细胞生成减少或缺失。真性红细胞增多症，或原发性红细胞增多症（红细胞质量增加）是由于红细胞过度生产而未受刺激的结果。因此，血红蛋白的增加导致EPO产生减少，从而导致血清EPO水平低于正常。继发性红细胞增多症，也以总红细胞质量增加为特征，是由于组织缺氧引起的循环EPO水平升高的生理反应。缺氧可能是由于肺纤维化、心血管疾病、长期暴露于高海拔、异常血红蛋白形式或药物治疗等因素。一些肿瘤会产生EPO，在这些情况下，EPO可用作肿瘤标志物，以监测治疗的有效性。EPO ELISA用于定量测定人血清中的促红细胞生成素（EPO）。该测定用于体外诊断，检测EPO水平升高或降低，作为贫血和红细胞增多症诊断的辅助手段。

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EPO(促红细胞生成素)EIA*， 96孔，IVD使用使用检测原理：

促红细胞生成素免疫测定是一种双位点酶联免疫吸附测定（ELISA），用于测量生物活性的165个氨基酸链的EPO。它利用两种不同的针对人EPO的明确区域的鼠单克隆抗体。一种鼠单克隆抗体对人EPO进行生物素标记，另一种鼠单克隆抗体对人EPO进行辣根过氧化物酶（HRP）标记以进行检测。在这种测定中，校准品、对照品或患者样本与酶标记的抗体和生物素偶联抗体在链霉亲和素包被的微孔板孔中同时孵育。在测定孵育结束时，洗涤微孔以去除未结合的成分，并将固相上的酶与底物四甲基联苯胺（TMB）孵育。然后加入酸性终止溶液以停止反应，并将颜色变为黄色。黄色的强度与样本中EPO的浓度直接成正比。使用校准品获得的结果生成吸光度单位与浓度的剂量反应曲线。对照品和患者样本中存在的EPO浓度可以直接从这个曲线中确定。这些标准品已经与世界卫生组织（WHO）的重组DNA衍生的促红细胞生成素国际标准进行了校准。使用的WHO参考标准是促红细胞生成素第一国际标准（87/684）。

组成：

样本收集和储存：

EPO的测定应使用人血清进行。为了对样本进行双重测定，需要400微升的人血清。强烈建议在上午7:30至中午12:00之间收集样本，因为文献中已经报告了促红细胞生成素的日间变化。11,12 收集未加抗凝剂的全血，并在2°C至8°C下让血液凝固，如果可能的话。有报道称，在室温（22°C至28°C）下凝固的血清样本，通过放射免疫测定法评估，EPO值在冰上凝固后大约降低了30%。13 然后，应尽快分离出血清，最好在冷藏离心机中进行，并将血清储存在-15°C或更低的温度下。血清样本可在2-8°C下储存长达24小时。在-15°C下冷冻的血清样本可稳定保存长达12个月。不要在自动除霜的冷冻柜中储存样本。避免样本反复冷冻和解冻。对于样本的长期储存，建议在冷冻前将样本分装到样本管或瓶中。使用前，让所有样本恢复至室温（22°C至28°C）并轻轻倒置或旋转混合。避免使用明显溶血或明显脂血的样本。

文献参考：

1. Sawyer, S.T., Krantz, S.B., Sawada, K. Receptors for Erythropoietin in Mouse and HumanErythroid Cells and Placenta. Blood 1989; 74: 103-109.

2. Imai, N., Kawamura, A., Higuchi, M., et al. Physicochemical and Biological Comparison ofRecombinant Human Erythropoietin with Human Urinary Erythropoietin. J Biochem 1990; 107:352-359.

3. Jacobson, L.O., Goldwasser, E., Fried, W., Pizak, L.F. The Role of the Kidney inErythropoiesis. Nature 1957; 179: 633-634. 

ALPCO产品种类多样，可测样品来源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、猪、羊、狗、猴等，涉及神经生物学、骨代谢、心血管疾病和氧化应激、细胞因子与信号转导、糖尿病和肥胖症、内分泌学、甲状腺功能、肠胃病学、免疫学、生殖激素、抗体和抗原、分子诊断等多个研究领域，尤以糖尿病和肥胖症研究领域见长。

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