ALPCO ACTH EIA IVD使用在内分泌疾病诊断中的重要性

ACTH（肾上腺皮质激素或促肾上腺皮质激素）是一种39个氨基酸的肽类激素（分子量=4500），由垂体分泌，用于调节肾上腺皮质产生类固醇激素。垂体前叶分泌的ACTH受到经典的负反馈控制机制和中枢神经系统（CNS）应激介导的控制系统的双重调控。1 大脑中较高层次感知到的各种类型的压力疼痛调节下丘脑神经分泌激素——促肾上腺皮质激素释放激素（CRH）的分泌，CRH是一种41个氨基酸的肽。CRH刺激垂体ACTH的分泌。第二种调节ACTH分泌的肽是血管加压素（AVP）。AVP的分泌也受到压力的刺激，并与CRH协同作用，增加垂体门脉循环中的ACTH分泌。ACTH增加所有肾上腺类固醇的合成和释放，包括醛固酮、皮质醇和肾上腺雄激素。它是人体最重要的糖皮质激素——皮质醇的主要调节因子。随着血液中皮质醇水平的升高，垂体水平的ACTH释放直接受到抑制。通过相同的机制，皮质醇水平的降低导致ACTH水平升高。2,3,4,5 生物活性ACTH是通过大前体分子——前阿片黑素皮质素（POMC）的酶解产生的。这个分子的结构中含有ACTH、前ACTH、β-黑色素细胞刺激激素、脂联素以及内啡肽和脑啡肽的氨基酸序列。由于免疫分析中的反应是由抗原结构决定的，而不是生物功能，通常的ACTH放射免疫分析（RIA）会与POMC、前ACTH、ACTH以及ACTH的一些片段发生反应。5 与其他垂体激素一样，ACTH以脉冲方式分泌。这些小脉冲叠加在特征性的昼夜波动上，波动幅度更大。在健康个体中，ACTH在清晨（06:00 - 08:00小时）达到峰值，而在一天晚些时候和睡眠期开始前水平最低。由于这种昼夜节律，通常在08:00至10:00小时之间抽取血浆ACTH样本。然而，区分库欣病患者和正常人可能最好在傍晚（16:00 - 18:00小时）获得的样本上实现。在库欣病和异位ACTH综合征中，ACTH分泌的昼夜模式通常不存在。压力也可能覆盖昼夜变化。ACTH ELISA用于定量测定人EDTA血浆中的促肾上腺皮质激素（ACTH）。本试验适用于美国的体外诊断。本产品在美国以外地区“仅供研究使用”。

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ACTH EIA IVD使用检测原理：

ACTH ELISA是一种双位点酶联免疫吸附测定法，用于测量ACTH的生物活性39个氨基酸链。通过亲和层析纯化的山羊人ACTH多克隆抗体和小鼠人ACTH单克隆抗体对ACTH分子上明确界定的区域具有特异性。制备一种抗体仅结合C末端ACTH 34-39，并且该抗体被生物素化。制备另一种抗体，仅结合中间区域和N端ACTH 1-24，该抗体用辣根过氧化物酶[HRP]标记进行检测。

在该测定中，校准品、对照品或患者样本在涂有链霉抗生物素蛋白的微孔板孔中与酶标记抗体和生物素偶联抗体同时孵育。在测定孵育结束时，清洗微孔以去除未结合的成分，并将结合到固相上的酶与底物四甲基联苯胺（TMB）一起孵育。然后加入酸性终止溶液以终止反应，并将颜色转化为黄色。黄色的强度与样品中ACTH的浓度成正比。使用校准器获得的结果生成吸光度单位与浓度的剂量响应曲线。对照组和患者样本中存在的ACTH浓度直接由该曲线确定。

样品收集和储存：

应在EDTA血浆样品上进行ACTH测定。为了对样品进行两次分析，需要400?L的EDTA血浆。用薰衣草[EDTA]管收集全血。血浆应立即分离，最好放在冷冻离心机中，并储存在-20℃或更低的温度下。EDTA血浆样品可在2-8°C下储存8小时。在-20°C下冷冻的EDTA血浆样本可稳定长达4个月。

文献参考：

1. Ryan, WG: Endocrine Disorders – A Pathophysiologic Approach, 2nd Edition Year BookMedical Publishers, Inc. 1980.

2. Watts, N.B., J.H. Keffer: Practical Endocrine Diagnosis, Third Edition, Lea and Febioer, 1982.

3. Ganong, WF. Alpert LC, Lee TC: ACTH and the Regulation of Adrenocorticol Secretion, N.Engl. J. Med. 290: 1006, 1974.

4. Tepperman, J: Metabolic and Endocrine Physiology, 4th Edition, Year Book MedicalPublishers, Inc., 1981.

5. Odell, W.D., R. Horton, M.R. Pandian, J. Wong: The Use of ACTH and Cortisol Assays in theDiagnosis of Endocrine Disorders. Nichols Institute Publication, 1989.

ALPCO产品种类多样，可测样品来源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、猪、羊、狗、猴等，涉及神经生物学、骨代谢、心血管疾病和氧化应激、细胞因子与信号转导、糖尿病和肥胖症、内分泌学、甲状腺功能、肠胃病学、免疫学、生殖激素、抗体和抗原、分子诊断等多个研究领域，尤以糖尿病和肥胖症研究领域见长。

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