Assay Genie 组织固定液/4%聚甲醛（不含DEPC）：应用与特性研究

在生物医学研究中，组织固定是实验流程中极为关键的一步。它不仅能够保持组织和细胞的形态结构，还能有效防止自溶和微生物分解，为后续的组织学分析、免疫组化、免疫荧光等实验提供可靠的样本基础。4%聚甲醛（Paraformaldehyde，PFA）固定液作为一种常用的固定剂，因其温和的固定效果和良好的抗原保存能力，被广泛应用于各类实验中。

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4%聚甲醛固定液的特性

-成分与pH值：4%聚甲醛固定液通常由聚甲醛、磷酸盐缓冲液（PBS）和去离子水组成，pH值约为7.2-7.4。这种中性环境有助于减少抗原表位的破坏，同时避免了酸性或碱性环境可能引起的组织损伤。

-固定原理：聚甲醛通过形成分子间的交联，固定细胞或组织的三维结构。与甲醛相比，聚甲醛性质更稳定，对抗原的破坏能力更弱，因此在科学研究中被广泛使用。

4%聚甲醛固定液的应用

-免疫组化（IHC）与免疫荧光（IF）：4%聚甲醛固定液能够很好地保存组织的抗原性和细微结构，适用于免疫组化和免疫荧光实验。它能够确保抗体与抗原的特异性结合，从而实现对特定蛋白的精确定位。

-细胞固定：在细胞实验中，4%聚甲醛固定液可用于固定细胞，保持细胞的形态和结构，适用于免疫细胞化学（ICC）和流式细胞术（FACS）等检测。

-组织固定：对于组织样本，4%聚甲醛固定液能够均匀固定组织，减少组织收缩和损伤，便于后续的组织切片和染色。

使用方法与注意事项

-使用方法：

组织固定：室温或2-8℃浸泡固定2-24小时，用缓冲液漂洗后即可树脂包埋用于组织切片。

切片固定：室温或2-8℃固定10分钟-2小时，视切片厚度而定，用缓冲液漂洗后即可用于染色。

细胞固定：室温或2-8℃固定10-30分钟，用缓冲液漂洗后即可用于染色。

-注意事项：

4%聚甲醛固定液有毒，操作时需注意适当防护，建议穿实验服并戴一次性手套。

组织取材的厚度不同，固定时间也不同。常规活检组织比较适合的厚度为2-4mm，一般不超过6mm。

固定液的容量应足够，一般固定液与组织块的体积比率应大于10:1。

不含DEPC的4%聚甲醛固定液

在某些实验中，如RNA相关实验，为了避免RNA降解，需要使用不含DEPC（焦碳酸二乙酯）的4%聚甲醛固定液。DEPC是一种常用的RNA酶灭活剂，但其本身可能对某些实验产生干扰。因此，不含DEPC的4%聚甲醛固定液更适合这些实验。

总结

4%聚甲醛固定液因其温和的固定效果和良好的抗原保存能力，在生物医学研究中被广泛应用。无论是组织固定、细胞固定还是免疫组化和免疫荧光实验，它都能提供可靠的样本基础。在使用过程中，需注意固定时间和条件的控制，以确保实验结果的准确性和可靠性。

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