大鼠CYPD(亲环素D)ELISA试剂盒检测步骤及操作说明

检测原理：

本试剂盒采用夹心酶联免疫吸附测定法。试剂盒中提供的微孔板已预先涂有一抗大鼠CYPD的特异性抗体。将标准品或样本加入适当的微孔板孔中，然后加入生物素标记的特异性抗体。接着，向每个微孔中加入辣根过氧化物酶（HRP）偶联的链霉亲和素，并进行孵育。加入TMB底物溶液后，只有含有大鼠CYPD、生物素标记抗体和酶偶联链霉亲和素的孔才会发生颜色变化。通过加入硫酸溶液终止酶-底物反应，并在450 nm ± 10 nm波长下通过分光光度法测量颜色变化。通过将样本的吸光度（OD）与标准曲线进行比较，确定样本中大鼠CYPD的浓度。

艾美捷大鼠CYPD(亲环素D)ELISA试剂盒：

编号：AEKE02419

规格：96次检测

反应性：大鼠

同义词：PPID、CYP-40、CyP-D、PPIase D、肽酰脯氨酰异构酶D、环加氧酶40、40 kDa肽酰-脯氨酰顺反异构酶、环加氧酶相关蛋白、旋转酶D

检测类型：夹心法

灵敏度：0.117 ng/mL

检测范围：0.32-20 ng/mL

标准品浓度：20 ng/mL

检测时间：3.5小时

样本类型：组织匀浆、细胞裂解物、细胞培养上清液和其他生物体液

大鼠CYPD(亲环素D)ELISA试剂盒内容：

Component Quantity Storage

48T 96T

Pre-Coated Microplate 6stripsx 8wells 12stripsx 8wells 4 -20

Standard(Lyophilized) 1vial 2vials 4 -20°C/ °C

Biotinylated Antibody(100×) 60μL 120μL 4 -20°C/ °C

Streptavidin-HRP(100×) 60μL 120μL 4 -20°C/ °C

Standard/Sample Diluent Buffer 10m L 20m L 4°°CC//-20°°CC

Biotinylated Antibody Diluent 6m L 12m L 4°C/-20°C

HRP Diluent 6m L 12m L 4°C/-20°C

Wash Buffer(25×) 10m L 20m L 4°C/-20°C

TMB Substrate Solution 6m L 10m L 4 -20 (storeindark)

Stop Reagent 3m L 6m L 4°C/-20°C°C/ °C

Plate Covers 1piece 2pieces RT

检测步骤：

注意：以下步骤为示例操作流程。每批次/批号的操作流程可能有所不同。请按照试剂盒中附带的操作手册进行正确操作。

步骤操作流程：

在试剂盒达到室温平衡后，向每个孔中加入100 μL标准工作液（根据说明书逐步稀释）或100 μL样本，并在37°C下孵育80分钟。

弃去板内液体，向每个孔中加入200 μL 1×洗涤缓冲液，洗涤板3次。轻轻拍干后，向每个孔中加入100 μL生物素标记抗体工作液（1×），在37°C下孵育50分钟。

弃去板内液体，向每个孔中加入200 μL 1×洗涤缓冲液，洗涤板3次。轻轻拍干后，向每个孔中加入100 μL 1×链霉亲和素-HRP工作液，在37°C下孵育50分钟。

弃去板内液体，向每个孔中加入200 μL 1×洗涤缓冲液，洗涤板5次。轻轻拍干后，向每个孔中加入90 μL TMB底物溶液，在37°C下避光孵育20分钟。

向每个孔中加入50 μL终止液，使用酶标振荡器振荡1分钟以充分混合。立即在450 nm处记录吸光度（OD），并进行结果计算。