Assay Genie 小鼠hs-CRP(高敏C反应蛋白)ELISA试剂盒的检测原理和操作步骤

hs-CRP是一种重要的炎症标志物，广泛应用于小鼠炎症反应的研究。该试剂盒可用于检测小鼠血清、血浆及其他生物样本中的hs-CRP浓度。通过监测hs-CRP水平，可以评估炎症反应的强度和进展，为炎症相关疾病的研究提供重要依据。

作为Assay Genie全国总代理，艾美捷科技强烈推荐Assay Genie热销产品小鼠hs-CRP(高敏C反应蛋白)ELISA试剂盒。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

检测原理

小鼠高敏C反应蛋白（hs-CRP）ELISA试剂盒采用双抗体夹心法进行检测。具体步骤如下：

1. 包被抗体：将特异性抗小鼠hs-CRP抗体预先包被在酶标板上。

2. 样本结合：将标准品或样本加入酶标板孔中，样本中的hs-CRP会与包被抗体结合。

3. 检测抗体：加入生物素标记的抗小鼠hs-CRP抗体，该抗体与样本中的hs-CRP结合。

4. 酶结合物：加入链霉亲和素-辣根过氧化物酶（HRP）结合物，与生物素标记的抗体结合，形成夹心复合物。

5. 显色反应：加入TMB底物，与HRP反应产生蓝色产物，加入终止液后颜色变为黄色。

6. 结果测定：在450 nm波长处测量吸光度（OD值），样本中的hs-CRP浓度与OD值成正比。

操作步骤

1. 试剂准备：

- 将所有试剂回温至室温（18-25°C）。

- 配制洗液、标准工作液、生物素化检测抗体工作液和HRP结合物工作液。

2. 加样：

- 将标准品或样本加入酶标板孔中，每孔100μL。

- 37°C孵育90分钟。

3. 加生物素化检测抗体：

- 弃去孔内液体，加入100μL生物素化检测抗体工作液。

- 37°C孵育1小时。

4. 洗涤：

- 弃去孔内溶液，加入350μL洗液，浸泡1分钟，弃去溶液并拍干。

- 重复洗涤3次。

5. 加HRP结合物：

- 加入100μL HRP结合物工作液。

- 37°C孵育30分钟。

6. 再次洗涤：

- 重复步骤4的洗涤过程5次。

7. 加底物试剂：

- 加入90μL底物试剂。

- 37°C孵育约15分钟，避光。

8. 加终止液：

- 加入50μL终止液。

9. 读数：

- 立即用450 nm波长的微孔板读数仪测定吸光度。

注意事项

1. 样本处理：所有样本在测试前需进行预处理，确保样本中无杂质。

2. 试剂保存：未使用的试剂应按要求保存，避免反复冻融。

3. 操作连续性：一旦开始实验，应尽量连续完成所有步骤。

4. 重复性检测：建议所有样本和标准品双份检测，以确保结果的可靠性。

小鼠高敏C反应蛋白（hs-CRP）ELISA试剂盒凭借其高灵敏度和特异性，已成为研究小鼠炎症反应的重要工具。通过严格的操作和准确的检测，该试剂盒可为相关研究提供可靠的数据支持。

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