人β-防御素-2（BD-2）elisa试剂盒样本的收集和处理方案

人β防御素2（hBD-2）ELISA试剂盒是一种夹心ELISA试剂盒用于定量BD-2人细胞培养物和适当合格的来自血清、唾液或其他组织液的样本。For仅供研究使用（RUO）；不用于治疗或诊断使用。

人β-防御素-2（BD-2）elisa试剂盒检测原理：

人类β防御素2（Human Beta Defensin 2，BD-2）ELISA试剂盒基于样品中的人类β防御素2与两种抗体的结合，一种固定在微孔板井中，另一种与生物素结合，随后与链霉亲和素辣根过氧化物酶（HRP）偶联物结合。经过洗涤步骤后，加入显色底物，并通过HRP在TMB底物上的酶促反应产生颜色，该颜色与样品中存在的BD-2量成正比。加入终止液以终止反应，然后使用ELISA微孔板读数器测量450nm处的吸光度。样品中BD-2的浓度是根据指定浓度的纯化重组人类BD-2的标准曲线计算得出的。

艾美捷人β-防御素-2（BD-2）elisa试剂盒：

货号：ADI-100-250-BD2

储存和稳定性：如果未开封，微孔板和其他所有试剂在2-8摄氏度下稳定，直至标签上打印的有效期。工作溶液的稳定性在试剂准备部分指明。

特异性：本试剂盒中使用的抗体经过亲和纯化，使用纯化的重组人类BD-2免疫吸附剂，并已通过ELISA显示特异性与hBD-2反应，基本上不与重组hBD-1、hBD-3或hNP1反应。

需自备的材料：

- 能够提供100微升和1-10毫升的移液器和移液管。推荐使用多通道移液器。

- 用于稀释样本和抗体HRP浓缩液的一次性玻璃或塑料5-15毫升管。

- 用于稀释洗涤浓缩液的量筒；0.2至1升。

- 用于储存稀释洗涤液的储液瓶；200毫升至1升。

- 用于稀释试剂浓缩液的蒸馏水或去离子水。

- 450纳米波长的微孔板读数器。

人β-防御素-2（BD-2）elisa试剂盒样本收集和处理：

培养基、生物加工制剂、血清和其他生物液体在适当稀释以避免溶液基质干扰的情况下可以使用作为样本。对于血清，通过静脉采血，允许凝血，并在室温下通过离心分离血清。对于所有样本，在用样本稀释液稀释之前，通过离心和/或过滤澄清。如果样本不会立即检测，可冷藏保存数周，或冷冻长期保存。

结果计算：

结果可以使用任何免疫分析软件包进行计算。推荐使用四参数曲线拟合。如果没有软件可用，BD-2浓度可以按照以下方式确定：

1. 计算重复样本的平均OD值。

2. 在坐标纸上，将标准品的平均OD值（y轴）与BD-2的浓度（pg/ml）（x轴）绘制出来。通过这些点绘制最佳拟合曲线，构建标准曲线。点对点构建是最常见和可靠的方法。

3. 通过插值从标准曲线确定未知样本和对照物中的BD-2浓度。

4. 将样本获得的值乘以每个样本的稀释因子。

5. 产生信号高于200 pg/ml标准品的样本应进一步稀释并重新检测。

人β-防御素-2（BD-2）elisa试剂盒典型结果：

Wells Standards, Control & Samples A450 pg/ml

A1, A2 Negative Diluent Control 0.04 0

B1, B2 6.25 pg/ml Standard 0.21 6.25

C1, C2 12.5 pg/ml Standard 0.36 12.5

D1, D2 25 pg/ml Standard 0.69 25

E1, E2 50 pg/ml Standard 1.39 50

F1, F2 100 pg/ml Standard 2.49 100

G1, G2 200 pg/ml Standard 3.21 200

H1, H2 Sample [Diluted 1:10] 1.55 68

Calculated: 10-fold dilution x 68 pg/ml = 680 pg/ml in serum