兔抗LEDGF/p75亲和纯化抗体：批次稳定，精准靶向

一、产品概述

由艾美捷Bethyl Laboratories推出的本品为兔源抗LEDGF/p75多克隆抗体（货号：A300-848A），经抗原亲和纯化制备，以未标记的完整IgG形式提供。该抗体特异性识别人类LEDGF/p75蛋白（转录共激活因子p75/p52），适用于免疫沉淀（IP）和蛋白质印迹（WB）应用，是研究转录调控、神经发生及慢病毒整合机制的重要工具。

二、核心产品参数

参数项目 具体规格

靶标蛋白 LEDGF/p75

反应种属 人

宿主来源 兔

克隆类型 多克隆

抗体形式 完整IgG

免疫原区域 介于480位氨基酸与C末端之间

抗体亚型 IgG

标记类型 未标记

纯化方式 抗原亲和纯化

抗原种属 人

工作浓度 200 ?g/ml

保存温度 2 - 8 °C

有效期 自收货之日起1年

缓冲体系 含0.1% BSA和0.09%叠氮化钠的Tris缓冲盐水

三、推荐应用与实验条件

3.1 应用稀释度汇总

应用技术 推荐用量/稀释度 备注

免疫沉淀（IP） 6 ?g / mg 裂解物 每毫克总蛋白使用6微克抗体

蛋白质印迹（WB） 1:2000 - 1:10,000

3.2 蛋白质印迹（WB）专用实验条件

通用条件：

封闭液及抗体稀释液：5% 牛奶-TBST

一抗孵育方式：过夜孵育

细胞裂解物Western Blot：

推荐二抗：山羊抗兔IgG重链和轻链抗体（货号A120-101P）

免疫沉淀产物的Western Blot：

推荐二抗：抗兔IgG轻链HRP标记抗体

封闭液补充：需添加5%正常猪血清（货号S100-020）

*注：使用轻链特异性二抗可避免检测免疫沉淀中抗体的重链信号干扰。*

四、免疫原与表位信息

4.1 免疫原区域

本抗体免疫原对应人LEDGF/p75蛋白第480位至C末端之间的区域。依据NP_150091.2（GeneID 11168）的编号体系，该蛋白全长530个氨基酸，因此表位映射在480–530位氨基酸之间。

4.2 表位位置

抗体识别的特异性表位位于靠近C末端的功能区域。该区域对于转录共激活活性及与整合酶等蛋白的相互作用具有重要生物学意义。

五、生产与纯化工艺

5.1 亲和纯化

采用固定于固相载体上的LEDGF/p75特异性表位进行亲和层析纯化，确保抗体针对目标表位具有高特异性。

5.2 浓度测定

免疫球蛋白浓度采用比尔定律（Beer’s Law）测定，计算依据为：1 mg/ml IgG溶液在280 nm波长处的吸光度值为1.4。

六、储存与稳定性

推荐储存条件：2°C至8°C冷藏，切勿冷冻

有效期：自收货之日起1年

缓冲液成分：Tris缓冲盐水，含0.1%牛血清白蛋白（BSA）和0.09%叠氮化钠

运输建议：冷藏运输，避免反复温度波动

七、LEDGF/p75靶标背景信息

7.1 功能概述

LEDGF/p75（Lens Epithelium Derived Growth Factor / Transcriptional Coactivator p75）是一种多功能的转录共激活因子，参与以下关键生物学过程：

1. 晶状体上皮细胞基因调控：最早在晶状体上皮细胞中被鉴定，参与晶状体发育相关基因的表达调节

2. 神经上皮干细胞分化：在神经上皮干细胞分化过程中发挥重要作用

3. 神经发生：参与神经元的生成与发育过程

4. 慢病毒与HIV整合：作为辅助因子，促进慢病毒和HIV病毒DNA整合入宿主细胞基因组

7.2 别名信息

CLL-associated antigen KW-7；dense fine speckles 70 kDa protein（DFS 70）；DFS70；LEDGF；lens epithelium-derived growth factor；p52；p75；PAIP；PC4 and SFRS1-interacting protein；PSIP2；transcriptional coactivator p52/p75；Transcriptional coactivator p75/p52

备注：该蛋白存在p75和p52两种亚型，均由PSIP1基因编码，本抗体可识别p75亚型。

八、使用注意事项

1. 叠氮化钠警示：缓冲液含0.09%叠氮化钠，操作时请佩戴适当防护装备

2. BSA说明：缓冲液中含0.1% BSA，可作为载体蛋白稳定抗体

3. IP用量计算：推荐用量为6 ?g抗体/mg总蛋白裂解物，请根据样本蛋白总量精确计算

4. 二抗选择关键：

检测细胞裂解物WB时，可使用识别重链和轻链的二抗

检测IP产物WB时，强烈建议使用抗兔IgG轻链HRP标记二抗，并添加5%正常猪血清以降低背景，避免IgG重链（约55 kDa）的干扰信号

5. 过夜孵育要求：WB实验中一抗需过夜孵育，请勿缩短孵育时间以确保检测灵敏度

*本说明书基于产品特性研究编写，使用者应结合具体实验体系进行优化验证。